一种单核细胞增生李斯特菌LAMP可视化检测方法技术

技术编号:9402491 阅读:136 留言:0更新日期:2013-12-05 04:53
本发明专利技术属于食源性病原菌分子检测技术领域,具体涉及一种基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因的LAMP可视化检测方法。反应体系包括针对靶基因prfA的4条特异性引物、LAMP检测的反应体系、显色溶剂和反应覆盖液。60℃温育50min,80℃5min后终止反应,电泳后阳性扩增产物为不同大小区带组成的阶梯式图谱。扩增产物中加入显色溶剂,肉眼观察结果,天蓝色为阳性,紫罗兰色为阴性。本发明专利技术特异性强,操作简单,结果易于观察,可用于基层单位对于临床样品中单核细胞增生李斯特菌的初步筛选和快速检测。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种以prfA基因作为靶基因进行单核细胞增生李斯特菌的环介导等温扩增即LAMP检测的引物组合,其特征在于,所述引物组合的DNA序列如下所示:外引物prfA?B3:AAGCTTCCCGTTAATCGA;外引物prfA?F3:GGCTTTCGTTATAATGTCTGG;内引物prfA?BIP:AACTACTGAGCAAAAATCTTACGCAGCTAGACTGTATGAAACTTGTT;内引物prfA?FIP:TAGCCTGCTCGCTAATGACTTTATTGATACAGAAACATCGGTT。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:栗绍文张超孟宪荣蔡旭旺潘秀华
申请(专利权)人:华中农业大学
类型:发明
国别省市:

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