【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种检测空肠弯曲杆菌及其大环内酯类耐药位点突变的多重荧光定量PCR方法,其特征在于:利用特异性的荧光定量PCR反应液和荧光定量PCR反应条件,快速鉴别空肠弯曲杆菌及检测空肠弯曲杆菌对大环内酯类药物耐药靶基因的位点突变,所述的靶基因位点突变分别为空肠弯曲杆菌23SrRNA基因第2074和2075位突变,核糖体蛋白L4编码基因rplD?170位和221位突变;所述的荧光定量PCR反应液中分别含有VS1引物对和荧光探针组合,23S?rRNA引物对和荧光探针组合,以及rplD的引物对和荧光探针组合:①VS1引物对和荧光探针组合正向引物VS1?RT?F,其DNA序列如序列表SEQ?ID?NO:8所示;反向引物VS1?RT?R,其DNA序列如序列表SEQ?ID?NO:9所示;VS1?MGB荧光探针,其DNA序列如序列表SEQ?ID?NO:10所示;利用引物对VS1?RT?F和VS1?RT?R扩增得到214bp的片段,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:11所示,该片段位于空肠弯曲杆菌特异性鉴别基因VS1全序列的931~1144位;VS1?MGB荧光探针的5’端以HEX荧光基团标记,3’端以非荧光淬灭 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:袁宗辉,刘杰,郝海红,王玉莲,戴梦红,黄玲利,程古月,王旭,彭大鹏,陈冬梅,陶燕飞,刘振利,谢长清,
申请(专利权)人:华中农业大学,
类型:发明
国别省市:
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