【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种重组人白细胞介素27的制备方法,其特征在于包括如下步骤:(1)克隆人白细胞介素27基因:分别扩增人白细胞介素27的EBI3片段和P28片段,将其克隆到载体pFASTbac?dual上,得到IL?27的双表达转移载体pFASTbac?dual?IL27;????(2)表达重组人白细胞介素27的重组杆状病毒的获得:将上述转移载体pFASTbac?dual?IL27转化大肠杆菌DH10Bac,pFASTbac?dual?IL27与其中的Bacmid质粒重组构建重组转座质粒rBacmid,在脂质体介导下将rBacmid转染sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒;(3)在sf9昆虫细胞中表达重组人白细胞介素27:将重组杆状病毒感染sf9昆虫细胞,重组人白细胞介素27在sf9昆虫细胞中得到表达;(4)重组人白细胞介素27的纯化:将上述被重组的杆状病毒感染的sf9昆虫细胞培养3天后离心去掉细胞和细胞碎片收集上清,先后经过镍亲合层析柱和凝胶层析柱纯化得到重组人白细胞介素27。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:邬开朗,胡艳民,曹艳华,张威,吴建国,金晶,
申请(专利权)人:武汉大学,
类型:发明
国别省市:
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