一种利用Hoechst33342对猪囊胚进行简易荧光计数的方法技术

本发明专利技术一种利用Hoechst33342对猪囊胚进行简易荧光计数的方法，包括以下步骤：(1)、先将猪囊胚于DPBS液中洗涤干净，后放于DT液中透化；(2)、透化完成后放于EH液中脱水、固定、染色；(3)、最后置于甘油，石蜡-凡士林封片，荧光观察并计数。本发明专利技术方法具有染色压片后可以很好保持囊胚细胞原始形态，细胞与细胞间界限清晰，可以准确对猪囊胚进行计数；操作简单，基本每一枚囊胚都能很好进行染色，降低宝贵囊胚消耗；所需试剂及器材简单，适用于大部分胚胎生物学实验室，若做成试剂盒使用，可明显提高实验室囊胚质量评定效率的优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用Hoechst33342对猪囊胚进行简易荧光计数的方法，包括以下步骤：(1)、先将猪囊胚于DPBS液中洗涤干净，后放于DT液中透化；(2)、将步骤(1)中透化完成后的猪囊胚放于EH液中，在脱水固定后进行染色；其中EH液中Hoechst33342浓度为45μg/ml；(3)、将步骤(2)中染色后的的猪囊胚置于甘油，用石蜡?凡士林封片，荧光观察并计数；所述DT液是将99ml?DPBS加入0.01g?PVA混匀，加入1ml?Triton?X?100，摇床200rpm，30min，0.22μm滤器过滤所得；EH液的制备过程为：先将1mg?Hoechst33342加入1ml?DPBS中，0.22μm滤器过滤后得到母液；然后将9.55ml无水乙醇加入450μL?H母液，0.22μm滤器过滤得到EH液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘帅，石德顺，刘庆友，崔奎青，李红丽，钟俊洁，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：