一种体外筛选多肽的方法技术

技术编号:9311263 阅读:129 留言:0更新日期:2013-11-06 18:01
本发明专利技术属于化学生物学技术领域,公开了一种体外筛选多肽的方法。针对现有多肽胞内筛选技术的局限性,通过构建一个随机的dsDNA文库并转录成mRNA,在以mRNA为模板进行体外表达前先使其与末端带有嘌呤霉素的寡核苷酸链退火互补。在翻译即将结束时,嘌呤霉素进入核糖体并捕获新生成的多肽链形成共价结构,经反转录,形成一个表达多肽与其编码信息cDNA对应结合的随机文库。筛选结束后,设计引物对获得的cDNA进行PCR扩增,并进入下轮筛选,经过多轮循环,最终获得目标多肽及其编码信息。本发明专利技术采用完全体外筛选技术,文库容量可以达到1013~1015;体系稳定、操作简便、筛选效率高。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种体外筛选多肽的方法,其特征是:通过构建一个随机的dsDNA文库并转录成mRNA,在以mRNA为模板进行体外翻译前先使其与末端带有嘌呤霉素的DNA退火互补;在翻译即将结束时,嘌呤霉素进入核糖体并捕获新生成的多肽链形成共价结构,经反转录,形成一个表达多肽与其编码信息cDNA对应结合的随机文库;筛选结束后,对获得的cDNA进行PCR扩增,并进入下轮筛选,经过多轮循环,最终获得目标多肽及其编码信息。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:唐卓陈浩东
申请(专利权)人:中国科学院成都生物研究所
类型:发明
国别省市:

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