【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种利用双荧光素酶报告基因检测启动子活性的方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤1:根据牛MSTN基因5′调控区序列设计7组两端引物,以基因组DNA为模板,利用PCR反应进行扩增,获得7个不同长度MSTN基因5′调控区片段;对7个不同长度MSTN基因5′调控区片段进行酶切及纯化;再将7个不同长度MSTN基因5′调控区片段与所述的载体质粒的连接;然后筛选重组子;步骤2:进行目标细胞的培养和铺板;配制步骤1所述pGL3?basic?MSTNpro重组体与脂质体的混合物,以海肾荧光素酶载体pRL?TK为内参,扎克进行细胞转染;步骤3:用双荧光素酶报告基因进行荧光素酶活性检测;将步骤2所得的共转染后的细胞;经过培养后,进行收集;将所收集的细胞进行裂解;取20μl细胞裂解液于酶标板中,加入工作液,然后用发光仪进行测读。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:许厚强,刘敏,陈伟,陈祥,赵佳福,
申请(专利权)人:贵州大学,
类型:发明
国别省市:
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