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非水相催化手性醇不对称拆分的立体选择性脂肪酶的快速定量筛选方法技术

技术编号:9237564 阅读:128 留言:0更新日期:2013-10-10 01:19
本发明专利技术公开了一种非水相催化手性醇不对称拆分的立体选择性脂肪酶的快速定量筛选方法,利用脂肪酶在无溶剂体系中分别催化脂肪酸乙烯酯与两种立体构型的手性醇之间的转酯化反应,反应4-24小时后,吸取50μl两种构型手性醇的反应液用100μl品红醛在微量比色皿或多孔微孔板中显色,用比色法于500-540nm处测定吸光度或直接用酶标仪于500-540nm处测定吸光度,以确定乙醛的生成量,并根据两种立体构型的手性醇反应生成乙醛的量计算产物对映体过剩量、底物对映体过剩量和酶立体选择性,筛选出生产立体选择性脂肪酶的目的菌株。本发明专利技术简单易行、快速方便。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种非水相催化手性醇不对称拆分的立体选择性脂肪酶的快速定量筛选方法,其特征是:利用脂肪酶在无溶剂体系中分别催化脂肪酸乙烯酯与两种立体构型的手性醇之间的转酯化反应,所述脂肪酶是采用由脂肪酶生产菌制备成的细胞冻干粉或发酵液冻干粉;反应4?24小时后,吸取50?μl两种构型手性醇的反应液用100?μl品红醛在微量比色皿或多孔微孔板中显色,用比色法于500?540nm处测定吸光度或直接用酶标仪于500?540?nm处测定吸光度,以确定乙醛的生成量,并根据两种立体构型的手性醇反应生成乙醛的量计算产物对映体过剩量、底物对映体过剩量和酶立体选择性,筛选出生产立体选择性脂肪酶的目的菌株。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:于丽娟叶辉金大勇常燕徐磊刘思园王兴龙
申请(专利权)人:南通大学
类型:发明
国别省市:

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