一种表达口蹄疫病毒空衣壳的重组山羊痘病毒的构建方法技术

技术编号:9236089 阅读:430 留言:0更新日期:2013-10-09 23:33
本发明专利技术涉及一种表达口蹄疫病毒空衣壳的重组山羊痘病毒的构建方法,该方法以上、下游同源臂为基础构建转移质粒,中间依次插入口蹄疫病毒结构蛋白前体基因P1-2A、痘苗病毒背对背启动子P7.5-P11、黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因、口蹄疫病毒内部核糖体进入位点序列、口蹄疫病毒3C蛋白酶9位点突变体基因;将转移质粒与山羊痘病毒CVCCAV41株共转染MDBK细胞,以同源重组方式,将外源基因插入上、下游同源臂之间,筛选到的重组山羊痘病毒能稳定存在,并表达口蹄疫病毒空衣壳。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种表达口蹄疫病毒空衣壳的重组山羊痘病毒的构建方法,其特征在于按下列步骤进行:a、以上、下游同源臂为基础构建转移质粒,中间依次插入口蹄疫病毒结构蛋白前体基因P1?2A、痘苗病毒背对背启动子P7.5?P11、黄嘌呤?鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因、口蹄疫病毒内部核糖体进入位点序列、口蹄疫病毒3C蛋白酶9位点突变体基因,其中上游同源臂核苷酸序列为:5’―CTA?TCT?CGC?GCT?AAA?TGA?ATA?CAA?AAA?AAT?GAG?AAT?GTG?TAA?TAA?AAT?AAT?TTC?TGC?TAT?AGA?TTA?TCC?AAA?TAA?AAA?TCA?CAT?TTA?TAG?TGC?GAT?AAT?AGA?AAC?TGT?TAA?CAA?TTA?CTT?AGA?TAA?TCC?TCC?GAA?AAA?GCT?AGG?ATA?CAA?TAT?TGA?TAC?TTG?TTT?GAC?TAT?AGC?AAA?AAA?CAA?TTA?ACA?ACT?AAT?CAT?GGA?TTT?TAT?ACG?AAG?AAA?GTA?TTT?AAT?ATA?TAC?AAT?AGA?AAA?CAA?AGT?TGA?TTT?TTT?AAA?AGA?TGA?AGT?ACTAAC?AAA?GAT?ATC?AAA?CTT?TAC?ATT?AAA?TCA?TAT?ATT?AGC?CAT?TAA?ATA?TTT?AAT?TCT?TAA?CTT?TCC?TAG?AGA?TGT?TAT?ATC?AAA?AGA?TGT?ATT?ATC?GAA?CCC?AAA?TTT?TTA?TGT?TTT?TTT?ACA?TAT?GGT?AAA?GTG?TAA?TGA?CAT?TTA?TGA?GAC?TGT?TTT?AAA?ACA?TTC?GTT?CGA?TAT?TCC?TAC?GTT?ATA?TAT?AAA?AGC?ACT?TAT?AAA?AAA?TTA?TCC?GTT?ATT?TAA?TAA?CAC?AAT?AGA?AAG?ATA?TAA?AAC?TTT?AGT?TAG?TGA?ACT?TTT?TTT?AGA?CGA?TAA?ATT?TAT?CGA?AAT?AGT?AAA?ATA?TTC?GTC?TGA?ATT?TGA?TAA?TAT?CAT?AGC?TGT?TAA?TTA?CGA?TCT?TTT?ACT?AAA?TCC?TTT?ATT?CTA?TAA?TAA?TGA?ACC?GAT?TAA?AAA?TAT?GGA?AAT?TAT?TTA?TAG?TAA?ACT?TTT?TAA?AAA?ATC?TAA?TTT?TAG?GAA?GGT?AAA?AAA?AAT?GGA?GGT?TAT?CAG?ATT?AAT?GAT?ATG?GGC?GTA?CTT?AAG?TAA?ACA?AGA?TAC?TGG?ATT?AGA?TTT?TAC?TGA?TTT?TGA?CTC?TCA?AGA?TAT?ATA?TAC?ACT?GTT?TCA?AAA?AAG?TGA?TAA?AGT?TAT?TAT?TCA?TAG?TGA?TAT?GAC?AGA?AAA?GTT?TAA?AGA?GTA?TAT?TTT?TGG?GTC?GGA?AAA?AAC?TAG?TTA?TTG?GTT?ATG?GTT?AA―3’;下游同源臂核苷酸序列为:5’―ATG?AAT?CAA?TAT?TTA?ATG?ATA?ATG?TCT?ACA?ATG?AAG?GGG?TTG?CAG?AAT?TAA?TGT?ACG?ATA?AAA?TTC?TTA?GTT?TTA?TCT?ATT?CAG?AGA?TTA?AAC?AAG?GAA?GAG?TAA?ATA?AGA?ATA?TGC?TAA?AAT?TAG?TTT?ATA?TAT?TTG?AAA?ATG?ATG?AAT?ATA?TAC?AGT?CTA?TTT?TAT?TAC?AAA?TAA?TTT?ACG?GAG?TAC?CTG?GTG?ATA?TCT?TAT?CAA?TTA?TAG?ATG?TAA?AGG?ATG?ATA?ACT?GGA?AAA?AAT?ATT?TTA?TAG?GTT?TTT?ATA?AAG?AAA?ATT?TTA?TCG?ATG?GAA?AAA?CTT?TTA?TAA?GTG?CAA?AAA?CAT?TCA?ACT?ATG?ATT?TAT?TTA?AAG?TAG?TGG?CTA?AAA?TAA?ATC?CTG?AGT?ACT?TTG?ACC?CAG?ACA?AAA?TAA?TAT?CCA...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:马文戈魏婕杨会国魏玉荣苗书魁王延夏俊易忠薛英黄炯王力俭
申请(专利权)人:新疆维吾尔自治区畜牧科学院兽医研究所
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1