在Pichia pastoris中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法技术

本发明专利技术提供了一种利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法。本发明专利技术利用GAP启动子替换载体pPICMP1102中的AOX启动子，构建组成型重组表达载体pGAPMP1102并转化毕赤酵母X-33，获得的重组酵母经发酵培养，能够分泌产生MP1102。本发明专利技术首次实现菌丝霉素衍生物MP1102在毕赤酵母中组成型表达，经120小时培养后发酵液中总蛋白浓度达到387.6mg/L；发酵液上清经G25脱盐和SP离子交换层析后能够得到目标产物纯品，产量为105.84mg/L；经Genetools分析其纯度为95.13%。抑菌实验表明MP1102对金黄色葡萄球菌ATCC标准菌株有很强抑制作用，MP1102的MIC介于0.0028-0.11μM。本发明专利技术所述方法获得的MP1102可应用于抗菌药物、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂等领域，具有广阔的应用价值和市场前景。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种表达载体，其特征在于，含有毕赤酵母组成型启动子GAP、位于启动子下游的编码信号肽的核苷酸序列、编码菌丝霉素衍生物MP1102的基因序列和TAA，TAG终止子序列，所述编码MP1102的DNA序列5’端具有酵母Kex2切割识别序列AAGAGA。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王建华，张勇，滕达，王秀敏，毛若雨，
申请(专利权)人：中国农业科学院饲料研究所，
类型：发明
国别省市：