利用GST 表达体系制备的hZimp10-N 端高效价抗体及应用制造技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，涉及利用GST表达体系制备的hZimp10-N端高效价抗体及应用。利用基因工程技术，将hZimp10基因N端克隆到原核表达载体中，经酶切鉴定后,用重组质粒转化大肠杆菌，并IPTG诱导产生GST-hZimp10融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备抗血清并用ProteinA/G纯化。抗体的效价及特异性采用ELISA和Western?blot检测。该抗hZimp10多克隆抗体效价与特异性良好,可以应用于细胞中hZimp10蛋白的检测并能有效检出hZimp10蛋白在不同细胞中的差异表达，对于系统研究hZimp10蛋白功能及其在肿瘤细胞凋亡中的作用机制意义重大。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
利用GST表达体系制备的hZimp10?N端高效价抗体,其特征在于利用GST表达体系以hZimp10蛋白N端128个氨基酸对应DNA片段作为特异序列制备的GST?hZimp10融合蛋白作为抗原免疫动物产生抗血清而获得，该抗血清中抗GST?hZimp10抗体的滴度高达1∶100?000，并经过Western?blot鉴定该抗GST?hZimp10血清具有较好的特异性，其中，N端128个氨基酸序列为：?其对应核苷酸序列为：?1???atgaattcta?tggacaggca?catccagcag?accaatgacc?gactgcagtg?catcaagcag?61??cacttacaga?atcctgccaa?cttccacaat?gccgccacgg?agctgctgga?ctggtgcgga?121?gacccacggg?ccttccagcg?gcccttcgag?cagagcctga?tgggctgttt?gacggtggtc?181?agtcgggtgg?cagcccagca?aggctttgac?ctggacctcg?gctacagact?gctggctgtg?241?tgtgctgcaa?accgagacaa?gttcaccccg?aagtctgccg?ccttgttgtc?ctcctggtgc?301?gaagagctcg?gccgcctgct?gctgctccga?catcagaaga?gccgccagag?cgatccccct?361?gggaaactcc?ccatgcagcc?ccct。?re-FDA00003607753200011.jpg...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓萌，汪小莞，程秀，赵兵，杨南扬，王娜，李江，
申请(专利权)人：东北师范大学，
类型：发明
国别省市：