一种大规模哺乳动物工程细胞培养方法技术

本发明专利技术涉及一种大规模哺乳动物工程细胞培养方法。该方法包括（1）细胞复苏及摇床培养，（2）扩培罐培养，包括在培养基中于悬浮液中培养细胞，分三级进行；（3）生产罐培养。本发明专利技术将在生产罐中典型的15天的细胞培养缩短为8天，在扩培罐中培养生长7天，待细胞密度达到对数生长期后，再将细胞以高密度稀释到生产细胞罐中，继续生长培养8天至结束。本发明专利技术的细胞培养方法使得每一批次生产的周期缩短为典型培养的一半；该工艺使扩培罐和生产罐得到最大效率的利用，提高了设备的利用率。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种大规模动物工程细胞培养方法，包括以下步骤：（1）细胞复苏及摇床培养：将从液氮罐中取出的细胞株，在37℃水浴中复融，待细胞化开后置于含有50ml扩培培养基的250ml摇瓶中，放置于37℃、5%CO2培养箱中，150rpm摇床培养2?3天，使摇瓶中细胞密度生长到1.0×106～3.0×106cell/ml；所述扩培培养基为含有2mM?L?Gln、400ng/ml?G418和100nM?MTX的CD?Forti?CHO培养基；（2）扩培罐培养，包括在培养基中于悬浮液中培养细胞，分三级进行：2L罐扩培：将摇瓶中密度1.0×106～3.0×106cell/ml的细胞，以1:4～5的体积比例稀释到含有...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周凯松，王庆民，孙丽霞，曹平，夏庭坤，崔午阳，
申请(专利权)人：齐鲁制药有限公司，
类型：发明
国别省市：