磁珠分离大肠杆菌O157的方法技术

本发明专利技术公开了富集分离大肠杆菌O157(EscherichiacoliO157,E.coliO157)的方法，更好地为目的菌进行后续研究提供基础，涉及生物技术领域。方法包括扫帚分子与E.coliO157抗体共价偶联、抗体修饰的扫帚分子再包被长链生物素分子、抗体和长链生物素共修饰的扫帚分子捕获样品液中的目的菌、链霉亲和素修饰的纳米磁珠识别并偶联样品液中的长链生物素化扫帚分子、被捕获细菌的分离及重悬等步骤；重悬液可以直接进行后续分析，与传统的细菌磁分离方法相比，该方法更适用于在复杂基质中对细菌进行磁分离，提高了样品中目的菌分离效率。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
磁珠分离大肠杆菌O157的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)扫帚分子与大肠杆菌O157?特异性抗体偶联，摩尔偶联比为1:1，形成扫帚分子?抗体复合物；(2)将扫帚分子?抗体复合物与长链生物素偶联，加入过量长链生物素以封闭扫帚分子上裸露的氨基位点，形成长链生物素?扫帚分子?抗体复合物;(3)将上述长链生物素?扫帚分子?抗体复合物溶液加入到样品溶液中，以捕获样品溶液中的目的菌E.coli?O157，形成长链生物素?扫帚分子?抗体?E.coli?O157抗原复合物；(4)将修饰有链霉亲和素的纳米磁珠加入到上述混合溶液中通过链霉亲和素与长链生物素的亲和作用捕获长链生物素?扫帚分子?抗体?E.coli?O157抗原复合物，以形成终复合物纳米磁珠?链霉亲和素?长链生物素?扫帚分子?抗体?E.coli?O157抗原；将终复合物溶液磁力分离，去离子水轻轻清洗后，用PBS缓冲液混重悬即得富集有大肠杆菌O157的磁珠。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许恒毅，赖卫华，熊勇华，魏华，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：