棘孢木霉几丁质酶基因及其表达棘孢木霉几丁质酶的方法技术

本发明专利技术属于基因工程领域，具体地说是一种利用毕赤酵母工程菌株表达棘孢木霉几丁质酶的方法。发明专利技术以棘孢木霉（Trichoderma?asperellum）为材料获得了1个几丁质酶基因，命名为tachi1，DNA序列为1679bp，含有3个内含子、1个1275bp的ORF，编码424个氨基酸。构建重组表达载体pPIC9K/tachi1，利用电击法转化Pichia?pastoris?GS115，工程菌株GS-tachi1-K接种于含BMMY培养基中，在28℃、200?rpm/min振荡培养7.5?d，几丁质酶活达到17.93?U/mL，蛋白表达量为6.19?g/L。SDS-PAGE检测该蛋白的分子量为44?kDa，酶反应最适的温度和pH分别为50?℃和5.5，50?℃以下保持较高的酶活力，在酸性条件下稳定。该酶活性高、稳定性好，有比较重要的经济价值和社会价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种以棘孢木霉（Trichoderma?asperellum）为材料获得的几丁质酶基因，命名为tachi1，其特征在于：该基因DNA为1679?bp，含有3个内含子和一个由1275个核苷酸构成的开放阅读框，编码424个氨基酸，其具体的核甘酸序列为SEQ.NO.1。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：咸洪泉，汤伟，李雅华，夏伟，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：