一种快速低成本纯化CYP119酶的方法技术

本发明专利技术涉及一种快速低成本纯化CYP119酶的方法，其方法在于：将含有CYP119酶的大肠杆菌裂解，加热，离心除去沉淀，收集上清。逐渐向上清中加入(NH4)2SO4固体，至其质量百分比浓度为40%，离心去除沉淀，收集上清。逐渐向上清中加入(NH4)2SO4固体，至其质量百分比浓度为60%。离心后去除上清，收集沉淀。沉淀用10mMKH2PO4溶液溶解，即得到CYP119酶溶液。该方法条件温和、操作简便、速度快、成本低，采用这种方法，CYP119酶的纯度能达到80%左右，并且具有很好的活性。本方法在大规模提纯CYP119酶方面具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速低成本纯化CYP119酶的方法，其特征在于：（1）将含有CYP119酶的菌体裂解液，在60℃加热1小时，离心去除沉淀，收集上清；（2）在0.5小时内逐渐向由（1）所得上清中加入(NH4)2SO4固体，至(NH4)2SO4最终质量百分比浓度为40%，离心去除沉淀，收集上清；（3）在0.5小时?内逐渐向由（2）所得上清中加入(NH4)2SO4固体，至(NH4)2SO4最终质量百分比浓度为60%，离心去除上清，收集沉淀；（4）将由（3）所得沉淀用10?mM?KH2PO4缓冲溶液（pH=2）在4℃缓慢搅拌溶解，即得到CYTP119酶的溶液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋华麟，张为波，陈萍华，罗胜联，罗旭彪，
申请(专利权)人：南昌航空大学，
类型：发明
国别省市：