一种从疏花水柏枝中提取抗氧化剂的方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种抗氧化剂的提取方法及利用该抗氧化剂保护神经细胞抗氧化的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术以疏花水柏枝为原料、以乙醇作为提取溶剂通过索氏提取，原提液经HCl冷浸，饱和NaCO3调pH，氯仿萃取，经硅胶柱层析氯仿-甲醇梯度洗脱，Sephadex?LH-20凝胶柱甲醇洗脱，结晶、重结晶即得到本抗氧化剂。本抗氧化剂经1H-NMR、13C-NMR鉴定为3,4-二甲氧基-5-羟基苯甲酸甲酯，分子式为C10H12O5，具有较强的抗氧化性和自由基清除能力。抗氧化剂的浓度为0.5～12.5μg/mL，加药量为100μL时，本天然抗氧化剂对SH-SY5Y细胞的毒性小于3.4%，其对过氧化氢氧化损伤后的人神经母瘤细胞SH-SY5Y细胞的相对存活率为50～80%，比PG(没食子酸丙酯)有更好的抗氧化保护作用，可作为天然无毒抗氧化剂，应用于食品、医药和化妆品等领域。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种天然抗氧化剂，包括以疏花水柏枝为原料、乙醇为溶剂提取并纯化得到天然植物抗氧化剂，具体步骤如下：（1）将疏花水柏枝在40?60℃下干燥，粉碎后的粉末放入提取罐中；(2)向提取罐中加浓度为50%?95%的乙醇，其料液质量比为1:5?10，70?80℃常压回流2小时，重复2?4次操作，合并滤液，过滤，减压低温浓缩得到乙醇提取物浸膏；(3)用适量浓度为4%HCl冷浸浸膏，得到酸水液；(4)酸水液用饱和NaCO3调节pH至7；(5)用氯仿萃取，将氯仿萃取物旋转蒸发浓缩；(6)经氯仿?甲醇梯度洗脱硅胶柱纯化；(7)收集流分并减压低温浓缩，浓缩液经Sephadex?LH?20凝胶柱甲醇洗脱；(8)洗脱液结晶、重结晶即得到本抗氧化剂；该物质为淡黄色粉末，经1H?NMR、13C?NMR鉴定为3,4?二甲氧基?5?羟基苯甲酸甲酯，分子式为C10H12O5，结构式为：FDA00003002942300011.jpg

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘士平，田伟，薛艳红，曾文，孔玉珊，仇敏，
申请(专利权)人：三峡大学，
类型：发明
国别省市：