【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种棉花子叶瞬时表达外源基因的方法,其特征在于它由下述步骤组成:(1)棉花种植棉花种子37℃浸泡12小时,将营养土与蛭石按质量比为3:1混合成栽培土,吸水8小时,待表面湿润后,种植棉花种子,覆土,25℃、湿度51±2%、16小时光照、8小时黑暗、光照强度24000lux的培养箱中培养至棉花种子萌发;(2)制备转化液吸取含有外源基因+GUS表达载体的农杆菌GV3101与LB液体培养基按1:50的体积比加入到LB液体培养基中,在LB液体培养基中加入50mg/mL的卡那霉素、50mg/mL的利福平、20mg/mL的庆大霉素,LB液体培养基与50mg/L的卡那霉素、50mg?L/的利福平、50mg/L的庆大霉素的体积比为1:0.001:0.001:0.001,28℃,180转/分钟振荡培养15~18小时,制备成600nm的OD值为0.3~0.6的菌液,将菌液10000转/分钟离心1分钟,去除上清液,收集菌体,加入MS液体培养基和侵染液混匀,菌体与MS液体培养基、侵染液的体积比为1:90:10,得到转化液;上述外源基因用pCambia1301或pCambia2301或pBI121按常规的载体构建 ...
【技术特征摘要】
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