表达 PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒制造技术

本发明专利技术涉及一种PCV2密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒，属于生物制药领域。人工合成密码子优化的PCV2ORF1和ORF2基因，命名为YHsfORF1-2。将YHsfORF1-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacHTA中，即获得重组质粒pFBHYHsfORF1-2。而后将重组质粒转染Sf9细胞，获得重组杆状病毒vFBHYHsfORF1-2。在重组杆状病毒vFBHYHsfORF1-2中，ORF1和ORF2蛋白能够成功的高效表达，并能形成病毒样颗粒。本发明专利技术还涉及该重组病毒在疫苗方面的应用，动物试验证明由该重组病毒所制的灭活疫苗，可刺激机体产生高效的免疫应答，对PCV2有较好的免疫保护作用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
表达2型猪圆环病毒（PCV2）密码子优化ORF1和ORF2串联基因的重组病毒，其特征在于，是由以下方法构建而成：1）?密码子优化PCV2?ORF1和ORF2基因人工合成经密码子优化的PCV2?ORF1和ORF2基因，该基因定名为YHsfORF1?2，其序列为SEQ.ID.NO.1，将YHsfORF1?2连入pMD?18T载体，获得pMD?18T??YHsfORF1?2；2）?重组质粒pFBHYHsfORF1?2的构建与鉴定将pMD?18T?YHsfORF1?2中YHsfORF1?2基因用SpeI和XholI双酶切，克隆到用相同双酶切线性化的pFastBacHTA载体上，得到重组质粒pFBHYH...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王小敏，何孔旺，汪伟，周忠涛，俞正玉，倪艳秀，温立斌，张雪寒，郭容利，吕立新，李彬，周俊明，茅爱华，叶青，周萍，沈江萍，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：