一种柑橘成年态外植体材料的幼态化处理方法技术

一种柑橘成年态外植体材料的幼态化处理方法，包括以下步骤：（1）将柑橘成年态接穗反复嫁接于幼年砧木上；（2）外植体材料的获得；（3）不定芽再生。本发明专利技术将成年态接穗反复嫁接于实生砧木上的幼态化方法，适合柑橘多个品种；经过处理后的柑橘成年态材料污染率低，甚至为0；不定芽再生效率高，不定芽诱导率高达67.7%以上，特别适合于冰糖橙、糖橙等柑橘主栽品种的成年态外植体材料的幼态化。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种柑橘成年态外植体材料的幼态化处理方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将柑橘成年态接穗反复嫁接于幼年砧木上：首先以嫁接5年以上母树上的饱满芽为接穗，一年生直径达到0.6?cm以上的盆栽实生酸橙为砧木，采用“芽接法”进行嫁接，嫁接口为离土面向上10?15?cm处，嫁接苗生长一年后，取饱满芽为接穗，一年生直径达到0.6?cm以上的盆栽实生酸橙为砧木，再次采用“芽接法”进行嫁接，嫁接口为离土面向上10?15?cm处；嫁接后，将砧木在嫁接口往上8?12cm处沿嫁接面的侧面向下弯曲进行弯砧处理；之后，及时抹掉砧木上萌发的萌蘖，并在嫁接芽萌发后基部叶片达到最大时剪去嫁接口以上砧木部分；所有嫁接材料培养于温室中，温度为24?26℃；（2）外植体材料的获得：?按步骤（1）反复嫁接幼态化处理后，接穗芽直接萌发后获得的半木质化新梢为第1次梢，第1次梢生长老熟后留3?4个饱满芽进行短剪，萌发的半木质化新梢为第2次梢；取步骤（1）反复嫁接幼态化处理后，长20?cm以上的成年态半木质化的第1或第2次新梢的节间茎段作为再生和转化的外植体材料；将枝梢剪下，装入洁净塑料袋中，带回室内，在无菌条件下，先用棉花蘸取体积浓度为0.4?0.6%的次氯酸钠溶液对枝梢进行擦拭，然后切割成4?6cm的茎段，用体积浓度为70?75%的乙醇浸泡30?35s，用体积浓度为1.5?2%的次氯酸钠溶液加2?3滴吐温浸泡20?22?min，无菌水冲洗3?4次，去除两端与次氯酸钠溶液直接接触的部分，然后切割成0.8?1.2?cm的节间茎段，备用；（3）不定芽再生：将步骤（2）中获得的节间茎段外植体培养于再生培养基上，所述再生培养基包含MS无机盐以及1?mg/l?烟酸，0.2?mg/l?盐酸硫胺，1?mg/l?盐酸吡哆醇，并添加3?mg/l?6?苄基腺嘌呤，3%蔗糖和5.5g/l琼脂，pH值为5.7，培养温度26?28℃，完全暗培养14?16d后转入光照强度42?45μmol/m2/s，光照时间每天14?16?h，每2个星期继代培养一次，共继代1?2次，即成。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邓子牛，杨莉，胡威，谢玉明，葛红娟，
申请(专利权)人：湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：