检测乙型肝炎病毒耐药基因的RCA方法技术

技术编号:9084868 阅读:155 留言:0更新日期:2013-08-28 21:11
本发明专利技术公开了一种检测乙型肝炎病毒耐药基因的RCA方法,按照如下步骤完成:(1)HBV基因组PCR扩增;(2)单次RCA,再用1.0%的琼脂糖凝胶电泳,通过凝胶成像仪观察电泳结果。本发明专利技术锁式探针结合RCA技术是一种检测基因位点突变的新方法,通过锁式探针特异识别靶基因的点突变位点,RCA扩增放大检测信号。该方法不需特殊设备、操作简单、特异性好、灵敏度高,在病原体耐药位点突变检测方面具有独特优势。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测乙型肝炎病毒耐药基因的RCA方法,其特征在于,按照如下步骤完成:(1)、HBV基因组PCR扩增:a、提取HBV基因组:1)、在1.5ml螺旋盖离心管中加入0.1ml血清样品和0.6ml?Qlysis?V?Reagent,振荡30s混匀后室温放置10min;2)、将0.7ml异丙醇加入到步骤1)所得的混合溶液中,振荡30s混匀后,15000g室温离心15min;3)、将步骤2)所得的离心产物移弃上清液,再加入1.0ml70%乙醇,振荡数秒后15000g室温离心5min;4)、将步骤3)所得的离心产物移弃上清液,再加入100ul去离子水,反复吹打离心管官底和管壁的膜状沉淀,使其溶解,?20...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张波林钟劝
申请(专利权)人:中国人民解放军第三军医大学第一附属医院
类型:发明
国别省市:

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