一种利用固定化海藻糖合成酶生产海藻糖的方法技术

技术编号:9084852 阅读:245 留言:0更新日期:2013-08-28 21:11
本发明专利技术涉及一种利用固定化海藻糖合成酶生产海藻糖的方法,包括如下步骤:(1)将产酶菌株接种于发酵培养基中,培养30h~80h,制得发酵液;(2)将发酵液经菌体分离、菌体破壁、酶纯化,制得的海藻糖合成酶液;(3)进行交联包埋反应,制得固定化海藻糖合成酶;(4)将固定化海藻糖合成酶与麦芽糖底物溶液混合,经转化、分离,制得海藻糖。本发明专利技术转化率高、反应速度快、作用时间短、酶活稳定性及机械强度高的固定化海藻糖合成酶,从而提高了海藻糖的生产效率,降低了生产成本,缩短了生产周期。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用固定化海藻糖合成酶生产海藻糖的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将产酶菌株接种于发酵培养基中,在温度28℃~33℃的条件下,培养30h~80h,制得发酵液;上述发酵培养基组分如下,均为重量百分比:麦芽糖1%~10%,蛋白胨0.4%~2%,牛肉膏0.2%~1%,KH2PO40.1%~1%,MgSO4·7H2O0.01%~0.12%,余量水,pH6.0~8.0;上述产酶菌株选自热带假丝酵母(Candida?tropicalis)、大肠杆菌(Escherichia?coli)、玫瑰微球菌(Kocuria?roseus)、谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium?glutamicum)、灰色链霉菌(Streptomvces?avermitilis)、玫瑰链霉菌(Streptomyces?roseoflavus)、金黄色节杆菌(Arthrobacter?aurescens)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas?putida)或腾冲嗜热杆菌(Thermoanaerobacter?tengcongensis)之一;(2)将步骤(1)制得的发酵液经菌体分离、菌体破壁、酶纯化,制得的海藻糖合成酶液的酶活为35U/g湿菌体~60U/g湿菌体;(3)在戊二醛质量浓度为0.3%~1%,海藻糖合成酶液与壳聚糖凝胶的体积质量比为1:1~6:1、pH7.0~8.5、温度12℃~25℃的条件下,体积质量比单位为ml/g,进行交联包埋反应9h~20h,制得固定化海藻糖合成酶;(4)将步骤(3)制得的固定化海藻糖合成酶与麦芽糖底物溶液混合,经转化、分离,制得海藻糖。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘宗利王乃强薛雅莺张莉应汉杰李方华
申请(专利权)人:保龄宝生物股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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