绵羊myostatin基因donor载体的构建方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种绵羊myostatin基因donor载体的构建方法及其应用。本发明专利技术的绵羊myostatin基因donor载体具有较强的针对性，主要是结合在第三外显子与第二内含子结合处造成双链DNA断裂，可提高同源重组的效率，进而使绵羊myostatin基因的第三外显子突变，进而获得绵羊myostatin基因的敲除。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种绵羊myostatin基因donor载体的构建方法，其包括如下步骤：以绵羊基因组DNA为模板，使用上游引物gggcccgtgacacggcagaggttttaat和下游引物进行PCR扩增；经PCR扩增出含有ApaI和BamHI酶切位点的同源左臂序列SEQ?ID?NO.1；以绵羊基因组DNA为模板，使用上游引物ggtaccaggtaacagacacaccaaaaag和下游引物gggcccctactaccatgcctggaatctt进行PCR扩增，经PCR扩增出含有KpnI和ApaI酶切位点的同源右臂SEQ?ID?NO.2；将同源左臂序列和含有同样酶切位点的骨架载体pEGFP?C1分别进行Ba...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李万利，李文清，王二耀，徐照学，曹文广，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：