【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种小麦基因组中华山新麦草外源物质的鉴定方法,包括以下步骤:1)华山新麦草RAPD特异序列筛选及特异片段回收以华山新麦草和各种小麦近缘种属基因组DNA为模板,利用RAPD10碱基随机引物共500条进行PCR扩增,筛选华山新麦草特异多态性条带并回收该条带。2)华山新麦草RAPD特异序列的克隆根据T?A克隆法,将回收产物连接、克隆到pMD19?T载体上,转化至DH5α感受态细胞。经蓝白斑筛选,挑取白斑转化子的阳性克隆提取质粒DNA,酶切鉴定,测序。3)序列比对分析将测序结果提交至NCBI?GeneBank利用BLASTn和BLASTx进行序列比对。4)Southren?blott?ing检验序列的特异性为进一步验证华山新麦草特异性序列,以该序列为探针,Ns,ABD,A,AB,AG,AAG,B,C,D,E,H,I,K,M,PPP,B′C′,AtG,R,S,SY,SYW,St,StPY,U,V,W,Y基因组为模板进行Southren?blotting分析。5)SCAR引物设计、验证利用primer?v5.0和oligo?v6.0对华山新麦草特异性序列设计引物,以Ns,ABD,A,AB,AG,A ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:武军,杜万里,陈新宏,赵继新,杨群慧,刘淑会,王婧,庞玉辉,
申请(专利权)人:西北农林科技大学,
类型:发明
国别省市:
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