一种一锅法制备γ-谷氨酰小肽类化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种一锅法制备γ-谷氨酰小肽类化合物的方法。该方法包括下列步骤：采用5-羧乙基海因与氨基酸进行水相接肽反应，形成5-羧乙基海因小肽类化合物；反应完成后无需提取分离直接加入同时含有海因酶与氨甲酰酶的菌体为催化剂进行酶催化水解开环反应，得到γ-谷氨酰小肽类化合物。本发明专利技术方法采用海因环共保护谷氨酸的α-氨基和α-羧基，仅暴露出γ-羧基，保证了接肽反应的位置专一性；采用水相接肽，中间产物无需提取分离直接进行下一步酶反应，“一锅法”反应过程可有效提高反应总收率，同时水相反应也避免了有机溶剂带来的环境污染问题；采用酶法水解开环，避免了多数化学合成中反复的保护与脱保护步骤，减少了副反应的发生。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种采用一锅法制备Y -谷氨酰小肽类化合物的方法。
技术介绍
权利要求1.一种一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物(I)的方法，其特征在于该方法包括下列步骤:2.根据权利要求1所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于所述的Y-谷氨酰小肽类化合物(I)的R基团为甘氨酸、L-氨基酸、D-氨基酸、侧链保护L-氨基酸或侧链保护D-氨基酸的残基。3.根据权利要求1所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于步骤I)中，所述的水相接肽试剂为EDC.HCl/HOBt、EDC.HCl/HOOBt、EDC.HCl/HOAt和EDC.HCl/HOSu中的任意一种。4.根据权利要求1所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于步骤I)中，所述的水相接肽试剂与5-羧乙基海因的摩尔比为I 1.4: 1，氨基酸与5-羧乙基海因的摩尔比为I 1.6: I。5.根据权利要求1所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于步骤I)中，所述的水相接肽反应为先将水相接肽试剂与5-羧乙基海因反应I 8h，再加入氨基酸反应10 18h。6.根据权利要求1所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于步骤2)中，所述的同时含有海因酶和氨甲酰酶的菌体为芽孢杆菌(Bacillus fordii)MH602或洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepecia) JS-02。7.根据权利要求1所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于步骤2)中，所述的弱碱性条件为pH7.5 9.5。8.根据权利要求1所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于步骤2)中，所述的菌体与5-羧乙基海因小肽类化合物的重量比为1: 0.5 8。9.根据权利要求1所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于步骤2)中，所述的催化水解开环反应温度为35 45°C，反应时间为10 24h。10.根据权利要求2所述的一锅法制备Y-谷氨酰小肽类化合物的方法，其特征在于所述的L-氨基酸为L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-半胱氨酸、L-甲硫氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、L-赖氨酸、L-精氨酸、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸、L-组氨酸和L-脯氨酸中的任意一种； 所述的D-氨基酸为D-丙氨酸、D-缬氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨酸、D-丝氨酸、D-苏氨酸、D-半胱氨酸、D-甲硫氨酸、D-天冬氨酸、D-谷氨酸、D-天冬酰胺、D-谷氨酰胺、D-赖氨酸、D-精氨酸、D-苯丙氨酸、D-酪氨酸、D-色氨酸、D-组氨酸和D-脯氨酸中的任意一种； 所述的侧链保护L-氨基酸为O-保护-L-丝氨酸、O-保护-L-苏氨酸、S-保护-L-半胱氨酸、Νε -保护-L-赖氨酸、Νω-保护-L-精氨酸、O-保护-L-酪氨酸和Nim-保护-L-组氨酸中的任意一种； 所述的侧链保护D-氨基酸为O-保护-D-丝氨酸、O-保护-D-苏氨酸、S-保护-D-半胱氨酸、Ne -保护-D-赖氨酸、Νω-保护-D-精氨酸、O-保护-D-酪氨酸和Nim-保护-D-组氨酸中的任意 一种。全文摘要本专利技术公开了。该方法包括下列步骤采用5-羧乙基海因与氨基酸进行水相接肽反应，形成5-羧乙基海因小肽类化合物；反应完成后无需提取分离直接加入同时含有海因酶与氨甲酰酶的菌体为催化剂进行酶催化水解开环反应，得到γ-谷氨酰小肽类化合物。本专利技术方法采用海因环共保护谷氨酸的α-氨基和α-羧基，仅暴露出γ-羧基，保证了接肽反应的位置专一性；采用水相接肽，中间产物无需提取分离直接进行下一步酶反应，“一锅法”反应过程可有效提高反应总收率，同时水相反应也避免了有机溶剂带来的环境污染问题；采用酶法水解开环，避免了多数化学合成中反复的保护与脱保护步骤，减少了副反应的发生。文档编号C12R1/07GK103243141SQ20131019986公开日2013年8月14日 申请日期2013年5月27日 优先权日2013年5月27日专利技术者周佳栋, 曹飞, 姚琴, 王月霞, 李晓婉, 文斌斌, 汤智群, 韦萍 申请人:南京工业大学本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种一锅法制备γ?谷氨酰小肽类化合物(1)的方法，其特征在于该方法包括下列步骤：1)以5?羧乙基海因为起始物，与氨基酸在水相接肽试剂作用下进行水相接肽反应，形成5?羧乙基海因小肽类化合物，无需提取分离直接进行下一步酶反应；2)步骤1)得到的5?羧乙基海因小肽类化合物，在弱碱性条件下，以同时含有海因酶与氨甲酰酶的菌体为催化剂，催化水解开环得到相应的γ?谷氨酰小肽类化合物。FSA00000901336000011.tif

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周佳栋，曹飞，姚琴，王月霞，李晓婉，文斌斌，汤智群，韦萍，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：