一种测定茶多酚硬脂酸酯含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定茶多酚硬脂酸酯含量的方法，属于化学定量检测领域。所述方法包括：将对照品和供试品分别制备成对照品溶液和供试品溶液；通过分别绘制所述对照品溶液和所述供试品溶液的紫外波长扫描图确定检测波长；绘制所述对照品溶液的标准曲线并计算所述标准曲线的回归方程；测定所述供试品溶液的吸光度；将所述吸光度带入所述标准曲线回归方程计算所述供试品中茶多酚硬脂酸酯的含量。本发明专利技术通过对茶多酚硬脂酸酯以及含有茶多酚硬脂酸酯的制剂进行含量测定，避免通过测定酚羟基的含量间接反映茶多酚硬脂酸酯含量，这样就无需加入显色剂或氧化剂，避免了使用昂贵的标准品和昂贵的仪器设备条件，降低了成本，而且测定方法简便、准确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化学定量检测领域，特别涉及。
技术介绍
茶多酹(Green Tea Polyphenols, GTP)是一种性能十分优异的纯天然抗氧化剂，无毒副作用，具抑制细菌、抗氧化等性能，但茶多酚易溶于水而难溶于脂，因而直接将其用于抗油脂及高脂食品的氧化变质便受到很大限制，茶多酚硬脂酸酯是茶多酚的硬脂酸氧酰化产物，是脂溶性茶多酚的一种，与茶多酚一样，茶多酚硬脂酸酯同样具有抗氧化等广泛的药理作用，且各组分具有较强的协同作用。现有技术中有一种在植物油中检测微量脂溶性茶多酚的方法，该方法首先以没食子酸乙酯为标准品，采用酒石酸亚铁比色法，以亚铁离子为显色剂，通过茶多酚类能与亚铁离子形成紫蓝色络合物，测定脂溶性茶多酚的含量，然后用已知含量的脂溶性茶多酚作为对照品，采用福林酚试剂氧化法，测定植物油中微量脂溶性茶多酚的含量。 在实现本专利技术的过程中，专利技术人发现现有技术至少存在以下问题:相对于茶多酚的理化性质，脂溶性茶多酚在组成、结构、平均分子量、分子中邻二酚羟基或连三酚羟基的数量和与亚铁离子显色的强度等均发生了较大的变化，在这种情况下，上述方法仍然采用没食子酸乙酯与表没食子儿茶素没食子酸酯在相同质量下与亚铁离子显色物吸光度的比值1.5，而且，上述方法是通过测定酚羟基的含量间接反映脂溶性茶多酚的含量，导致其测定结果偏低，不能直接得到脂溶性茶多酚的含量，而且该方法较为繁琐，只适用于微量脂溶性茶多酚的检测。
技术实现思路
为了解决现有技术中不能准确测定茶多酚硬脂酸酯含量的问题，本专利技术实施例提供了。所述技术方案如下:本专利技术提供了，所述方法包括以下步骤:将对照品和供试品分别制备成对照品溶液和供试品溶液，所述对照品为表没食子儿茶素没食子酸酯硬脂酸酯；通过分别绘制所述对照品溶液和所述供试品溶液的紫外波长扫描图，获得所述对照品溶液和所述供试品溶液的最大吸收波长，并根据所述最大吸收波长确定检测波长；绘制所述对照品溶液的标准曲线并计算所述标准曲线的回归方程；采用紫外分光光度法测定所述供试品溶液的吸光度；将所述吸光度带入所述标准曲线回归方程计算所述供试品中茶多酚硬脂酸酯的含量。具体地，所述供试品为茶多酚硬脂酸酯或含有所述茶多酚硬脂酸酯的制剂，所述供试品溶液的溶剂为有机溶剂。具体地，通过所述供试品溶液的紫外波长扫描图确定所述供试品溶液的最大吸收波长的方法为:所述供试品为所述茶多酚硬脂酸酯时，将所述茶多酚硬脂酸酯配制成每毫升含有所述茶多酚硬脂酸酯为0.04mg的所述供试品溶液，以所述有机溶剂为参比，在200-400nm波长范围内扫描，得到所述供试品溶液的紫外波长扫描图，由所述紫外波长扫描图确定所述供试品溶液的最大吸收波长为275nm。具体地，通过所述供试品溶液的紫外波长扫描图确定所述供试品溶液的最大吸收波长的方法为:所述供试品为所述含有茶多酚硬脂酸酯的制剂时，取所述制剂适量，精密称定，置于容器中，加适量所述有机溶剂，充分搅拌，于离心机3600rpm离心30min,分取上清液，并重复提取3次，合并所述上清液并过滤，将滤液移入容量瓶，用所述有机溶剂定容，配制成每毫升含有所述茶多酚硬脂酸酯为0.04mg的所述供试品溶液，以制备所述供试品溶液的方法制备等质量空白制剂提取液作为参比，在200-400nm波长范围内扫描，得到所述供试品溶液的紫外波长扫描图，由所述紫外波长扫描图确定所述供试品溶液的最大吸收波长为275nm。具体地，所述对照品溶液的溶剂为所述有机溶剂。具体地，通过所述对照品溶液的紫外波长扫描图确定所述对照品溶液的最大吸收波长的方法为:取所述表没食子儿茶素没食子酸酯硬脂酸酯，用所述有机溶剂溶解，配制成每毫升含有所述表没食子儿茶素没食子酸酯硬脂酸酯为0.04mg的所述对照品溶液，以所述有机溶剂为参比，在200-400nm波长范围内扫描，得到所述对照品溶液的紫外波长扫描图，由所述紫外波长扫描图确定所述对照品溶液的最大吸收波长为275nm。具体地，根据所述对照品溶液与所述供试品溶液的最大吸收波长均为275nm，确定所述检测波长为275nm误差为±2nm。具体地，绘制所述对照品溶液的标准曲线并计算所述标准曲线的回归方程的方法为:取干燥的所述表没食子儿茶素没食子酸酯硬脂酸酯，用所述有机溶剂溶解，配制成每毫升含有所述表没食子儿茶素没食子酸酯硬脂酸酯分别为0，20，40，60，80和100 μ g的所述对照品溶液，以所述有机溶剂为参比，于275nm波长处测定吸光度，并绘制所述对照品溶液的标准曲线，由所述标准曲线经计算`得所述线性回归方程为:Y=0.0091Χ，其中，线性范围为0-100 μ g/mL，确定系数R2为0.9993，Y为所述对照品溶液的吸光度，X为所述对照品溶液的浓度。具体地，测定所述供试品溶液的吸光度的方法为:所述供试品溶液的浓度在线性回归方程的线性范围以内，当所述供试品为所述茶多酚硬脂酸酯时，以所述有机溶剂为参比；当所述供试品为所述含有茶多酚硬脂酸酯的制剂时，以所述空白制剂提取液为参比，于275nm波长处测定所述供试品溶液的吸光度。具体地，所述含有茶多酚硬脂酸酯的制剂为以所述茶多酚硬脂酸酯为主药的凝胶剂、霜剂、软膏剂、涂剂、涂膜剂、膜剂和贴剂中的至少一种的药物制剂。具体地，所述有机溶剂为无水乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、正已烷、环己烷、石油醚和二甲基亚砜中的至少一种。优选地，所述有机溶剂为无水乙醇、乙酸乙酯。本专利技术实施例提供的技术方案带来的有益效果是:本专利技术通过对茶多酚硬脂酸酯以及含有茶多酚硬脂酸酯的制剂进行含量测定，避免通过测定酚羟基的含量间接反映茶多酚硬脂酸酯含量，这样就无需加入显色剂，避免了使用昂贵的标准品和昂贵的仪器设备条件，降低了成本，而且本专利技术测定方法简单可行，测定结果准确，易于推广应用，本专利技术的测定方法也适用于含有茶多酚硬脂酸酯的制剂中有复杂共存成分存在时茶多酚硬脂酸酯的含量测定，其测定结果准确。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术提供的茶多酚硬脂酸酯的紫外波长扫描图；图2是本专利技术提供的表没食子儿茶素没食子酸酯硬脂酸酯的紫外波长扫描图；图3是本专利技术实施例四提供的含有茶多酚硬脂酸酯凝胶剂的紫外波长扫描图；图4是本专利技术实施例四提供的空白凝胶剂的紫外波长扫描图；图5是本专利技术提供的表没食子儿茶素没食子酸酯硬脂酸酯在275nm波长处的标准曲线图。具体实施例方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术实施方式作进一步地详细描述。本专利技术所用试剂均为分析纯市售试剂。本专利技术提供的方法包括以下步骤:将对照品和供试品分别制备成对照品溶液和供试品溶液。通过分别绘制对照品溶液和供试品溶液的紫外波长扫描图，获得对照品溶液和供试品溶液的最大吸收波长，并根据最大吸收波长确定检测波长。绘制对照品溶液的标准曲线并计算该标准曲线的回归方程。采用紫外分光光度法测定供试品溶液的吸光度。将吸光度带入上述标准曲线回归方程计算供试品中茶多酚硬脂酸酯的含量。具体如下:取茶多酚硬脂酸酯4mg，用无水乙醇溶解并定容至IOOmL,以无本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定茶多酚硬脂酸酯含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将对照品和供试品分别制备成对照品溶液和供试品溶液，所述对照品为表没食子儿茶素没食子酸酯硬脂酸酯；通过分别绘制所述对照品溶液和所述供试品溶液的紫外波长扫描图，获得所述对照品溶液和所述供试品溶液的最大吸收波长，并根据所述最大吸收波长确定检测波长；绘制所述对照品溶液的标准曲线并计算所述标准曲线的回归方程；采用紫外分光光度法测定所述供试品溶液的吸光度；将所述吸光度带入所述标准曲线回归方程计算所述供试品中茶多酚硬脂酸酯的含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张涛，
申请(专利权)人：江汉大学，
类型：发明
国别省市：