活菌检测预处理装置及活菌检测预处理方法制造方法及图纸

技术编号:9001151 阅读:353 留言:0更新日期:2013-08-02 21:08
本发明专利技术提供了一种活菌检测预处理装置及活菌检测预处理方法。该预处理装置包括:壳体;设置于该壳体内的光照系统、制冷系统和样品模块;所述光照系统包括光源、散热风扇和散热器;所述制冷系统包括半导体制冷器、散热风扇和散热器;所述样品模块设置于所述光源与半导体制冷器之间;其中,所述样品模块上设置有与样品管相配合的样品管槽,且该样品管槽能使所置入的样品管具有朝向光源的管壁面。本发明专利技术还提供了一种活菌检测预处理方法和微生物检测方法。本发明专利技术的目的在于提供了一种对PCR及Real?time?PCR检测方法前的待测样品的预处理装置,并且通过该预处理装置进行的预处理方法,其操作简便,且效果良好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测技术,尤其涉及一种活菌检测预处理装置及活菌检测的预处理方法。
技术介绍
目前,在食品安全、环境水质检测和疾病预防控制工作中,微生物的检测技术主要有常规检测技术和分子生物学检测技术。常规检测技术主要是细菌分离培养方法,该方法培养细菌的阳性率低、培养时间长(通常为2-10天),无法满足当前对微生物检测快速、高通量、敏感的需求;而分子生物学检测技术,如PCR及Real time PCR技术主要是检测样品中微生物的DNA模板,具有快速、准确、半定量或定量检测的优点,但是该方法检测的是针对整个样品中所有微生物的DNA拷贝,包括具有生物活性的细菌DNA以及无生物学及卫生学意义的死亡微生物释放的DNA,这样会造成检测的结果与实际具有生物学活性的细菌含量的偏差,出现“假阳性”结果,影响到检测和评估食品、环境样品及疾病预防控制中生物性样品的细菌含量的准确性。目前, 针对PCR及Real time PCR检测技术无法区分待测样品中的死细菌DNA与活细菌DNA,在微生物检测前先对待测样品实施前处理或预处理,对样品中的死菌DNA进行降解,以提高检测准确性。即,针对PCR及Real time PCR检测前的预处理过程已经有一些报道。例如:专利公开CN102605091A,专利技术名称“养殖场环境中病原菌活菌的EMA-PCR检测方法”,该检测方法利用了在待测样品加入EMA试剂,在卤素光源光照下进行预处理后,提取模板DNA,用模板DNA进行PCR检测;专利公开CN102146480A,专利技术名称“军团菌的活菌检测方法及检测试剂盒”,该检测方法同样也利用了 EMA降解待检样品中死菌胞内DNA,再提取待检样品DNA,通过荧光定量PCR检测样品中军团菌的活菌数。可以看到,包括上述公开在内的现有技术关注的都是待测样品的预处理过程的操作,而并没有公开相关的预处理装置对待测样品进行规范准确的预处理。即,现有技术的预处理过程都是将待测样品先在光源的照射下,通过EMA试剂对死细菌的DNA进行降解,分离后检测活细菌的DNA。在操作中,除了选择合适的处理剂,还需要将样品以适当的方式和手段置于光源下,才能完成达到预期的结果,技术人员只能根据大量实验摸索和积累的结果,通过经验对相关技术参数和方式进行设定,难以保证检测结果的准确性和稳定性。另一方面,现有技术需要使用热光源-卤素灯,此种光源的功率大,会产生大量的热量,也会导致待测样品中活细菌的DNA被降解,使后续检测值非正常降低,不能准确反映样品的真实结果。因此,在光照降解死细菌中的DNA过程中,通常需要使用冰浴来控制其降解过程在低温条件下进行,然而这种对低温的控制手段并不能够准确的控制温度,而且会因操作人员的失误,使冰浴长时间暴露于卤素灯的照射下完全融化,从而使待测样品所处环境的温度升高,导致样品失效,严重影响待测样品的安全。因此,如何设计一种预处理装置,可以通过调控光照和温度等技术参数,实现预处理方法的检测结果的规范化和准确化,一直是人们亟待解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于活菌检测的预处理装置,可以对需要PCR及Realtime PCR检测的样品进行前处理,利用该预处理装置可以实现对预处理参数的有效控制,并且操作简单,可实现微生物检测预规范化和准确化。本专利技术还提供了一种利用所述活菌检测预处理装置进行的预处理方法,该预处理方法操作过程简便,且效果良好。本专利技术提供了一种活菌检测预处理装置,该预处理装置包括:壳体;设置于该壳体内的光照系统、制冷系统和样品模块;所述光照系统包括光源、散热风扇和散热器;所述制冷系统包括半导体制冷器、散热风扇和散热器;所述样品模块设置于所述光源与半导体制冷器之间;其中,所述样品模块上设置有与样品管相配合的样品管 槽,且该样品管槽能使所置入的样品管具有朝向光源的管壁面。在本专利技术的预处理装置中,所述光源的上方依次设置散热器和散热风扇组成光照系统,且所述光源与所述散热器形成紧压贴合;所述半导体制冷器下方依次设置散热器和散热风扇组成制冷系统,且所述散热器与所述半导体制冷器形成紧压贴合。在本专利技术的预处理装置中,该预处理装置竖直放置时,所述光照系统设置于该预处理装置壳体内的上部,所述制冷系统设置于该预处理装置壳体内的下部,所述样品模块设置的样品管槽能使所置入的样品管的轴向与水平方向呈10-70°角倾斜放置,其倾斜角度优选30°,该角度可以使样品管充分接受光源的照射,并且使待测样品不易外溢,不污染管口。在本专利技术的预处理装置中,所述样品模块上设置有多个样品管槽,所述多个样品管槽之间可以平行设置,也可以使样品管槽呈圆盘放射状设置。根据实际需要,可以在样品模块上排布一组或多组样品管槽,且每组的放置方式可以使样品管的封闭端朝向一致,且样品管的轴向与水平方向呈10-70°角放置,也可以使样品管的封闭端顶对顶相对放置,且样品管的轴向与水平方向呈10-70°角放置,在此不作具体限定。在本专利技术的预处理装置中,所述样品模块上设置有能监测光源照度的照度传感器;以及能监测制冷系统的温度传感器,进而调节半导体制冷器的工作,从而更加有效的控制样品I旲块中样品管中待检测样品的温度,保证待测样品中DNA的稳定性。在本专利技术的预处理装置中,所述样品模块位于制冷系统上,通过传热介质-导热硅胶脂与所述半导体制冷器形成紧压贴合,并且,制冷系统的散热器的上表面与该半导体制冷器通过传热介质-导热硅胶脂形成紧压贴合。该传热介质-导热硅胶脂可以有效的将半导体制冷器的热量传递给样品模块,再通过样品模块传递给样品管,同时该导热硅胶脂也可以起到粘合剂的作用。在本专利技术的预处理装置中,该预处理装置的壳体可以为具有上开口的筒状壳体,并具有可对该壳体密封扣合的盖体,所述光照系统设置于该盖体上;该预处理装置的壳体也可以为侧壁设有开口,并设置有可对该壳体密封的扣合机构,所述样品模块可经所述开口取出或置入。在本专利技术的预处理装置中,所述样品模块通过滑轨结构设置在壳体内壁上或壳体底部的制冷系统的散热风扇和散热器之间。样品模块可方便地沿导轨推拉,从预处理装置中被拉出或推进。本专利技术的预处理装置中,样品模块与光照系统之间的距离可以根据需要进行设置调整,例如,光源的照度,样品管的设置角度以及待测样品的性质等。在本专利技术的具体实施方式中,可以使所述样品模块与所述光源的最小垂直距离为2-lOcm。本专利技术的预处理装置中,所述光源为冷光源,例如:LED灯。冷光源-LED灯相比于热光源-齒素灯,具有良好的光学性质。本专利技术的预处理装置中,所述壳体为工程塑料壳体,且壳体内壁为镜面不锈钢内壁。在该预处理装置的壳体内壁设置为镜面不锈钢材料可以从不同角度反射光源发出的光,避免了光损失,能够充分的照射样品管,使其光照面积足够大。在本专利技术的预处理装置中,所述样品模块为铝合金模块。在本专利技术的预处理装置中,该预处理装置还包括控制主板,控制光照系统和制冷系统的电源装置, 以及能显示预处理过程中的光照和/或温度状态的显示装置。本专利技术还提供了一种活菌检测的预处理方法,采用所述的预处理装置,使待测样品中的死细菌被降解,所述预处理方法包括以下步骤:将装有待测样品和试剂的样品管置于所述预处理装置中与样品管相配合的样品管槽;在光源下连续曝光照射样品管,并控制样品模块温度为2本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种活菌检测预处理装置,其特征在于,该预处理装置包括:壳体;设置于该壳体内的光照系统、制冷系统和样品模块;所述光照系统包括光源、散热风扇和散热器;所述制冷系统包括半导体制冷器、散热风扇和散热器;所述样品模块设置于所述光源与半导体制冷器之间;其中,所述样品模块上设置有与样品管相配合的样品管槽,且该样品管槽能使所置入的样品管具有朝向光源的管壁面。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:周旭董海燕陈伟东谢明汤米·周刘晓晨
申请(专利权)人:北京博瑞立安生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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