本发明专利技术提供从全血中分离血浆的系统、装置、试剂盒和方法。特别地,本发明专利技术提供以最少的能量输入从全血中分离出固定体积血浆的系统、装置和方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术提供从全血中分离血浆的系统、装置、试剂盒和方法。特别地,本专利技术提供以最少的能量输入从全血中分离出一定量(如固定体积)血浆的系统、装置和方法。
技术介绍
在复合生物流体可以被用于分析分析物前,需要许多上游步骤。例如,为进行HIV病毒载量检测,将血浆从血液中分离是第一个上游步骤,因为血红蛋白和血细胞会干扰随后的病毒RNA的扩增和检测。分离血浆对传染性疾病的检测和诊断也是一个关键的上游步骤。例如,用HIV特异性抗体检测成年人中的HIV或使用HIV核心p24蛋白检测婴儿中的HIV,都需要从全血中分离血浆。在实验室条件下,从全血中分离血浆是通过将血液以3000g离心20分钟来实现。这样做时,血液的固体组分在沉积物中下沉,而上清液由血浆组成。该方案通常需要受过训练的实验员手动地将上清液吸出,以进行进一步的分析。虽然大型自动化样品制备系统能够省略手动步骤,但是这些设备是昂贵的仪表,这使得它们不适用于资源有限的检测或即时现场护理检测(point-of-care testing)。已经设计出了一些通过微流体平台(micro-fluidic platform)将离心血液分离与进一步的下游步骤整合的方法(Brenner et al.Special Publication-Royal Societyof Chemistry2004,296:566-568.,Haeberle et al.Lab on a Chip2006,6:776-781.,Kanget al.Special Publication-Royal Society of Chemistry2004,296:614-616.,Madou et al.Biomedical Microdevices2001,3:245-254.,Toner&Irimia.Annual Review of Biomedical Engineering2005,7:77-103.,Luo et al.J ClinMicrobio/2005, 43:1851-1857.,通过援引的方式将以上文献的全部内容纳入本文)。然而,这些方法仅对非常有限体积的全血有效,需要使用产生离心力的设备,容易堵塞和/或仅能达到有限的纯度。使用合成膜将血浆从血液分离避免了由离心分离和微流体系统出现的一些问题;然而由于需要多个过滤层,因此所述设备复杂(Vogel et al.BoehringerMannheim GmbH; 1984., Vogel et al.Boehringer Mannheim GmbH; 1989.,通过援引的方式将其纳入本文),该设备本身较脆且很难用于所使用的膜材料(如玻璃纤维),而且含有干扰试验的材料(Baumgardner&Loewen.Ahlstrom Filtration, Inc.; 1993., Loewen&Baumgardner.Tappi Journal 1996,79:183-184.,通过援弓I的方式将其全部纳入本文),且含有妨碍血液流进入滤器的材料(Suzuki&Ho:A magnetic force driven chaotic micro-mixer,pp.40-43; 2002:40-43. ,通过援弓I的方式将其全部纳入本文)
技术实现思路
在一些实施方式中,本专利技术提供一种过滤血浆的方法,所述方法包括:(a)提供:(i )过滤器模块,其中所述过滤器模块包括设置为允许血浆而不允许其他血液组分通过的过滤器;(ii)血浆收集模块,其中所述血浆收集模块包括设置为通过毛细管作用将血浆吸进血浆收集模块的收集膜jP(iii)血样;(b)将血样加到过滤器模块的过滤器中;(c)将血浆收集模块的收集膜放置为直接与过滤器模块的过滤器接触;和((1)通过过滤器将血浆吸入血浆收集模块中。在一些实施方式中,所述吸入是被动的。在一些实施方式中,所述吸入不需要电泳、离心或高于大气压的压力。在一些实施方式中,过滤器模块可容纳固定体积的血样。在一些实施方式中,所述血浆收集模块可容纳固定体积的血浆。在一些实施方式中,所述血浆收集模块的固定体积小于过滤器模块的固定体积。在一些实施方式中,血浆收集模块的固定体积不依赖于血样的体积。在一些实施方式中,血浆收集模块的固定体积不依赖于血样的血细胞比容。在一些实施方式中,过滤器包括VIVID GF膜。在一些实施方式中,收集膜包括AHLSTR0M142纤维收集垫。在一些实施方式中,收集膜包括PALL A/D纤维收集垫。在一些实施方式中,所述方法进一步包括(e)将血浆存储到血浆收集模块中。在一些实施方式中,本专利技术提供一种将血浆从全血中分离的装置,所述装置包括:(a)过滤器模块,其中所述过滤器模块包括设置为允许血浆而不允许其他血液组分通过的过滤器;和(10血浆收集模块,其中所述血浆收集模块包括设置为通过毛细管作用将血浆吸进血浆收集模块的收集膜。在一些实施方式中,过滤器模块可容纳固定体积的全血。在一些实施方式中,血浆收集模块可容纳固定体积的血浆。在一些实施方式中,血浆收集模块的固定体积小于过滤器模块的固定体积。在一些实施方式中,过滤器包括VIVID GF或VIVIDGR膜。在一些实施方式中,收集膜包括AHLSTR0M142,PALL ACCUffIK或PALL A/D纤维收集垫。在一些实施方式中,所述设备在收集模块中包括PMPs。在一些实施方式中,所述设备在收集模块中包括分析试剂。本文中还描述了其他的实施方式。附图说明图1显示了膜的侧视图,所述侧视图显示了膜上的血液加样点、膜上的血液前端和血衆前端。图2显示了横向流动结构,所述结构显示了将血细胞从血浆分离的样品垫,收集固定体积血浆的收集垫和收集额外血浆的吸水垫。图3显示了纵向流动设置:细胞分离膜和血浆收集膜被夹在塑料顶板和底板之间。图4显示了多聚阳离子季铵盐(poly-cation-merquat)的化学结构。图5显示了循环阈值(Ct)对1gui的作图(HIV-1病毒RNA的拷贝):方形表示当使用IPF方法纯化含有HIV-1的血浆样品时获得的Ct值;菱形表示用VFl将血浆从含有HIV-1的全血中分离时和用Ahlstroml42收集血浆时获得的Ct值。图6显示了由IOX技术制作的柱芯片的横截面图,该视图显示了高为14μ m且底部尺寸为151μ m的柱子。图7显示了一种示例性的血浆单元设计。该血浆单元有两部分,分别为细胞分离模块和血浆模块。在分离后,将该血浆模块移走并转移到系统分析仪中用于处理的卡盘中。图8显示了一种示例性的第一代血浆分离和收集模块:(左)与分离模块连接的PALL VIVID GR细胞分离膜;(中间)与收集模块连接的PALL ACCUWIK血浆收集膜;(右)用于将血浆从全血中分离的彼此连接的细胞分离和收集模块。图9显示了一种示例性的第二代血浆分离和收集模块:(从左到右)与带有粘合剂的PALL VIVID膜连接的细胞分离模块,与PALL ACCUffIK连接的抗旋转插入和螺钉定位装置。图10显示了一种用于血浆单元压力研究的定位机械结构。图11显示了将收集的血浆体积(正方形)和每毫升血液中600个hiv-Ι病毒拷贝预计的循环阈值(三角形)对加入到血浆单元中的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员:D·M·凯尔索,K·苏尔,A·纳巴蒂扬,A·M·扬奇克博贾诺,S·J·皮克瑞尔,S·詹佳姆,S·古普塔,
申请(专利权)人:西北大学,
类型:
国别省市:
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