此处描述了突变的、非天然发生的或转基因的植物或植物细胞,植物或植物细胞包括(a)选自如下的多核苷酸:(i)包括、由或基本上由具有与SEQ?ID?NO:1、2、27、28或29或51至少71%序列同一性的序列组成的多核苷酸;或(ii)包括、由或基本上由具有与SEQ?ID?NO:3-23或30-50中任一个至少65%序列同一性的序列组成的多核苷酸;或(iii)编码NtMRP多肽的多核苷酸,NtMRP多肽包括、由或基本上由具有与SEQ?ID?NO:24-26或52中任一个至少65%序列同一性的序列组成,且其中所述多肽具有重金属转运蛋白活性;或(b)长度上至少15个连续核苷酸的多核苷酸构建体,其与SEQ?ID?NO:1-23或27-51任一个的区域具有至少65%的序列同一性;或(c)双链RNA,其包括至少两条彼此至少部分互补的序列,且其中正义链包括第一序列,反义链包括第二序列,并且其中序列中的至少一个包括NtMRP?RNA的至少10个连续核苷酸;或(d)表达载体,其包括如(i)、(ii)或(iii)中所述的多核苷酸或如(b)中所述的多核苷酸构建体。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】植物中的重金属减少
专利技术涉及编码ABC转运蛋白的多核苷酸和多肽,ABC转运蛋白参与重金属转运。本专利技术还涉及在植物中改变所述多核苷酸或多肽的表达。尤其是,本专利技术涉及调节(例如,减少或抑制)一个或多个参与亚细胞重金属转运的ABC转运蛋白的表达或活性。
技术介绍
植物通过从它们的环境中利用根细胞和其它维管组织表面上表达的跨膜转运蛋白介导的各种转运机制吸收金属离子基质(substrate)获得必需的重金属,如锌和铜。一个机制利用将毒素运输到细胞溶质外的转运。例如,谷胱甘肽S-缀合物(GS-X)泵家族是一类负责消除/隔离植物以及哺乳动物、酵母细胞中的化合物的ATP-结合盒(cassette)(ABC)转运蛋白。哺乳动物和植物MRP、cMOAT(微管(canalicular)多特异性阴离子转运蛋白)和YCF1(酵母镉因子)基因编码的GS-X泵的分子结构和功能贯穿整个分子进化过程中似乎是保守的。植物暴露于外源性毒素-如微生物产物、化感物质(allelochemical)、农用化学品和重金属–使得细胞的存活依赖于脱毒或减少这些试剂的积累的机制。重金属-如铅、镉、汞等-是主要的环境毒物,其通过在活生物体的细胞中结合酶的活性位点而导致活性氧化物质的生成、DNA损伤和酶的失活。由于工业化和人口规模的增加,重金属环境污染急剧增加。重金属污染的土壤抑制植物的正常生长并导致食品污染。许多重金属在低浓度时就对人体健康具有很强的毒性并且是致癌的。非常希望并迫切需要减少动物和人类所消耗的植物或植物产品中的重金属-如镉–的含量。本专利技术的一个目的是满足这种需要。
技术实现思路
本专利技术的方面和实施方式如所附权利要求所示。在一个方面中,提供了一种选自如下的分离的多核苷酸:分离的多核苷酸,其包括、由或基本上由具有与SEQIDNO:1或SEQIDNO:2或SEQIDNO:27或SEQIDNO:28、SEQIDNO:29或SEQIDNO:51至少71%序列同一性的序列组成;分离的多核苷酸,其包括、由或基本上由具有与SEQIDNO:3-23或30-50或53中任一个至少65%序列同一性的序列组成;编码NtMRP多肽的多核苷酸,NtMRP多肽包括、由或基本上由具有与SEQIDNO:24-26或52中任一个至少65%序列同一性的序列组成,且优选地,其中所述多肽具有重金属转运蛋白活性。在另一方面中,提供长度上至少15个连续核苷酸的多核苷酸构建体,其具有与SEQIDNO:1-23或27-51任一个的区域至少65%的同一性。在另一方面中,提供双链核糖多核苷酸,其包括至少两条彼此至少部分互补的序列,且其中正义链包括第一序列,反义链包括第二序列,并且其中序列中的至少一个包括NtMRPRNA的至少10个连续核苷酸。适当地,双链RNA包括具有与NtMRPDNA的至少10个核苷酸至少65%序列同一性的第一序列;第二序列;以及和第一序列处于相同方向的、具有第一序列的反向互补序列的第三序列,其中第二序列位于第一序列和第三序列之间,以及第二序列有效地连接至第一序列和第三序列。适当地,第一序列与选自如下的序列具有至少65%序列同一性:SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:30、SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO:33、SEQIDNO:34、SEQIDNO:35、SEQIDNO:36、SEQIDNO:37、SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40、SEQIDNO:41、SEQIDNO:42、SEQIDNO:43、SEQIDNO:44、SEQIDNO:45、SEQIDNO:46、SEQIDNO:47、SEQIDNO:48、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50和SEQIDNO:53。适当地,第三序列与SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:30、SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO:33、SEQIDNO:34、SEQIDNO:35、SEQIDNO:36、SEQIDNO:37,SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40、SEQIDNO:41、SEQIDNO:42、SEQIDNO:43、SEQIDNO:44、SEQIDNO:45、SEQIDNO:46、SEQIDNO:47、SEQIDNO:48、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50和SEQIDNO:53相对应的序列的反向互补体具有至少65%序列同一性。在另一方面中,提供了表达载体,其包括分离的多核苷酸或多核苷酸构建体。在另一方面中,提供了突变的、非天然发生的或转基因的植物细胞,其包括分离的多核苷酸、多核苷酸构建体、双链核糖多核苷酸或表达载体。在另一方面中,提供了突变的、非天然发生的或转基因的植物,其包括突变的、非天然发生的或转基因的植物细胞。在另一方面中,提供了植物材料,其包括生物质、种子或叶子,植物材料包括来自所述植物的细胞或组织。在另一方面中,提供了烟草产品,其包括所述植物的部分或植物细胞或所述植物材料。在另一方面中,提供了突变的、非天然发生的或转基因的植物,其中NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性减少,并且所述植物的叶子的镉含量比对照植物减少至少5%,在对照植物中NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性没有减少。在另一方面中,提供了包括来自所述植物的组织的生物质、种子或叶子。在另一方面中,提供了用于在植物的至少部分中减少镉水平的方法,包括和对照植物相比,减少NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性的步骤,在对照植物中NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性没有减少。在另一方面中,提供了通过此处所述方法获得的或可获得的突变的、非天然发生的或转基因的植物,其中和对照植物相比,在植物的至少部分中减少至少约5%的镉含量,在对照植物中NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性没有减少。在另一方面中,提供了由SEQIDNO:24-26或SEQIDNO:52中任一个所示的序列表达的分离的NtMRP多肽,优选地本文档来自技高网...

【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.09.03 EP 10009180.01.一种烟草制品,其包括植物的部分或植物材料,其中所述植物材料包括生物质或叶子,所述生物质或叶子包括来自所述植物的细胞或组织,其中所述植物包括:(a)长度上至少20个连续核苷酸的多核苷酸构建体,其与编码NtMRP多肽的多核苷酸的区域具有100%同一性,所述NtMRP多肽如SEQIDNO:24-26或52中任一个所示,且其中所述多肽具有重金属转运蛋白活性;或(b)长度上至少20个连续核苷酸的多核苷酸构建体,其与SEQIDNO:1-23或27-51任一个的区域具有100%同一性;或(c)双链RNA,其包括至少两条彼此至少部分互补的序列,且其中正义链包括第一序列,以及反义链包括第二序列,并且其中序列中的至少一个包括由SEQIDNO:27或51编码的NtMRPRNA的至少19个连续核苷酸;或(d)表达载体,其包括如(a)或(b)中所述的多核苷酸构建体;其中NtMRP多核苷酸的表达和/或由此编码的蛋白的活性减少了,并且所述植物的叶子具有比对照植物减少至少5%的镉含量,在对照植物中NtMRP的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性没有减少。2.一种用于在植物的至少一部分中减少镉水平的方法,其包括,和对照植物相比,减少由SEQIDNO:27或51编码的NtMRP多核苷酸的表达和/或由此编码的蛋白的活性的步骤,在对照植物中NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性没有减少。3.一种分离的NtMRP多肽...
【专利技术属性】
技术研发人员:L·博韦,
申请(专利权)人:菲利普莫里斯生产公司,
类型:
国别省市:
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