【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及乳源ACE抑制肽制备
，特别涉及一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法。
技术介绍
随着经济的发展和人们生活水平的逐渐提高，饮食中脂肪和热量的比重也有了显著的提高，随着机械化、自动化、信息化程度的提高，导致了体力活动的减少，这些都引起了我国心脑血管疾病的发病率快速上升。心血管疾病以冠心病为主，冠心病又称冠状动脉硬化性心脏病，而高血压是动脉粥样硬化的重要危险因素，且血压水平与心血管发病危险呈正相关。2010年中国高血压防治指南指出，我国人群高血压患病率仍呈增长态势，每10个成人中就有2人患 高血压；估计目前全国高血压患者至少2亿。高血压是指在未使用降压药物的情况下，收缩压彡HOmmHg和(或)舒张压≥ 90mmHg。目前，常用于抗高血压药物治疗的有6种主要的降压药物，它们分别是利尿剂、α -受体拮抗剂、钙通道阻滞剂、血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂和α -肾上腺素受体阻滞剂。这些降血压药物虽然有显著的降压效果，但却存在一定的毒副作用，如引起咳嗽、过敏性血管水肿及肾功能不全加重等。有研究报道将食物蛋白质进行水解后形成的小分子多肽...
【技术保护点】
一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：将羊奶粉与水按照质量比例1:9进行混合溶解，将得到的复原羊乳冷却到4℃，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，除去脂肪，得到脱脂乳；步骤2：将所得脱脂乳在35?75℃范围内的恒温水浴箱中进行保温，采用磁力加热搅拌器进行搅拌，搅拌速度为0?1600rpm，边搅拌边滴加HCl溶液，使脱脂乳溶液的PH达到4.2?5.0，使酪蛋白进行沉淀，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，弃去上清液，将沉淀的酪蛋白进行冷冻干燥，在温度为?40℃预冻12?24h，再转移到冷冻干燥机在?55℃下冷冻...
【技术特征摘要】
1.一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括如下步骤: 步骤1:将羊奶粉与水按照质量比例1:9进行混合溶解，将得到的复原羊乳冷却到4°C，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，除去脂肪,得到脱脂乳； 步骤2:将所得脱脂乳在35-75°C范围内的恒温水浴箱中进行保温，采用磁力加热搅拌器进行搅拌，搅拌速度为0-1600rpm，边搅拌边滴加HCl溶液，使脱脂乳溶液的PH达到4.2-5.0,使酪蛋白进行沉淀,使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，弃去上清液,将沉淀的酪蛋白进行冷冻干燥，在温度为_40°C预冻12-24h，再转移到冷冻干燥机在-55°C下冷冻干燥24h，得到酪蛋白冻干粉，测定酪蛋白最大得率及条件； 步骤3:将上述步骤所得酪蛋白冻干粉制成质量浓度为10%的酪蛋白溶液100ml，分别用蛋白酶K、胃蛋白酶、中性蛋白酶、Alcalase、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶6种蛋白酶进行水解反应l_8h，酶与酪蛋白溶液的质量比为1:10，用恒温水浴箱及lmol/1 NaOH溶液分别调整酪蛋白溶液的温度和PH，测试不同种类的酶较优的水解条件及在该条件下达到的ACE抑制率，每间隔Ih将5ml水解液在90°C水浴中保持IOmin使酶失活，使用高速离心机在9000rpm的条件下离心20min，除去未水解的酪蛋白，收集上清液并采用紫外分光光度法测定ACE抑制率； 步骤4:在确定酶的种类及其较优水解条件的基础上，以ACE抑制率为指标，对水解过程进行优化，确定出该种类酶最佳的水解温度、PH、水解时间、酶与酪蛋白溶液的质量比； 步骤5:在确定最佳水解条件的基础上，检测在不同超声功率(0、90、180、225w)条件下对水解反应的影响。2.根据权利要求1所述的一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括如下步骤: 步骤1:将羊奶粉与水按照质量比例I: 9进行混合溶解，将得到的复原羊乳冷却到4°C，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，除去脂肪,得到脱脂乳； 步骤2:将所得脱脂乳在35°C的恒温水浴箱中进行保温，采用磁力加热搅拌器进行搅拌，搅拌速度为800rpm，边搅拌边滴加HCl溶液，使脱脂乳溶液的PH达到4.6，使酪蛋白进行沉淀，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，弃去上清液,将沉淀的酪蛋白进行冷冻干燥，在温度为_40°C预冻12h，再转移到冷冻干燥机在_55°C下冷冻干燥24h，得到酪蛋白冻干粉，测定得到当脱脂乳在35°C，PH为4.6，搅拌速度为SOOrpm条件下，酪蛋白得率最大，达到9.23%。3.根据权利要求1所述的一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括如下步骤: 步骤1:将羊奶粉与水按照质量比例1:9进行混合溶解，将得到的复原羊乳冷却到4°C，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，除去脂肪,得到脱脂乳； 步骤2:将所得脱脂乳在45°C的恒温水浴箱中进行保温，采用磁力加热搅拌器进行搅拌，搅拌速度为800rpm，边搅拌边滴加HCl溶液，使脱脂乳溶液的PH达到4.5，使酪蛋白进行沉淀，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，弃去上清液,将沉淀的酪蛋白进行冷冻干燥，在温度为_40°C预冻20h，再转移到冷冻干燥机在_55°C下冷冻干燥24h，得到酪蛋白冻干粉，测定得到当脱脂乳在45°C，PH为4.5，搅拌速度为SOOrpm条件下，酪蛋白得率最大，达到11.88%；步骤3:将上述步骤所得酪蛋白冻干粉制成质量浓度为10%的酪蛋白溶液100ml，用中性蛋白酶进行水解反应l_8h，酶与酪蛋白溶液的质量比为1:10，用恒温水浴箱及lmol/1NaOH溶液分别调整酪蛋白溶液的温度和PH，测试中性蛋白酶较优的水解及在该条件下达到的ACE抑制率，每间隔Ih将5ml水解液在90°C水浴中保持IOmin使酶失活，使用高速离心机在9000rpm的条件下离心20min,除去未水解的酪蛋白，收集上清液并采用紫外分光光度法测定ACE抑制率，测得中性蛋白酶在50°C、PH7.0的条件下，水解1.5h时，其ACE抑制率较大，为79.43%。4.根据权利要求1所述的一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括如下步骤: 步骤1:将羊奶粉与水按照质量比例I: 9进行混合溶解，将得到的复原羊乳冷却到4°C，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，除去脂肪,得到脱脂乳； 步骤2:将所得脱脂乳在45°C的恒温水浴箱中进行保温，采用磁力加热搅拌器进行搅拌，搅拌速度...
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