一种含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒制造技术

本发明专利技术提供了一种含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒。所述含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒由菌株Pandoraea?sp.的菌液经过提取与纯化得到的。向加入苯并[b]荧蒽及基础培养基、微量金属液和维生素c溶液的玻璃瓶内接种菌株Pandoraea?sp.，培养20天后得到菌液，对菌液经过提取与纯化得了到含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒。本发明专利技术得到的含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒可以构建对苯并[b]荧蒽具有降解功能的菌株，提高以苯并[b]荧蒽为代表的多环芳烃污染物的生物降解效果，对于多环芳烃苯并[b]荧蒽污染土壤及水体有应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物学与分子生物学
，具体涉及一种含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒。
技术介绍
多环芳经(PolycyclicAromatic Hydrocarbons,PAHs)是一类含有两个或两个以上苯环的有毒有机污染物，具有强烈的致癌作用、致畸作用和致突变作用。PAHs能通过生物累积及食物链的传递作用对生态环境和人体健康造成极大危害，已引起各国环境科学家的高度重视。对环境中多环芳烃的治理技术主要有物理法、化学法和生物法，其中生物法具有操作简单、运行费用低、无二次污染等优点。一般来说，随着多环芳烃苯环数量的增加，其降解速率降低。低分子量的多环芳烃在环境中能较快被降解，在环境中存在的时间较短，而高分子量的多环芳烃，例如芘、荧蒽、苯并[a]花、苯并[a]蒽、茚并[l，2，3_cd]花、苯并[b]荧蒽及苯并[k]荧蒽等则难于降解，较长期存在于环境中。因此，构建多环芳烃高效降解菌来强化降解已成为去除多环芳烃污染的一种重要方法。多环芳烃降解质 粒是细胞内能够自我复制的双链环状的小分子DNA，能降解芳香族化合物的代谢酶通常是由降解质粒基因编码的。因此，多环芳烃降解质粒上携带了本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒，其特征在于，该降解质粒由无色杆菌Achromobacter?sp.的菌液经过提取与纯化得到的，无色杆菌Achromobacter?sp.的菌种保藏号为CGMCC?No.3684，其中，从无色杆菌Achromobacter?sp.中提取与纯化含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒的具体方案为：(1)向体积为500mL的锥形瓶内加入400mL基础培养基、1.0mL微量金属液、0.1mL维生素c溶液，摇匀后作为液体培养基备用；其中基础培养基的组成为：NH4NO3：1.7g·L?1，KH2PO4：1.0g·L?1，K.2HPO4：1.0g·L?1，MgC...

【技术特征摘要】
1.一种含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒，其特征在于，该降解质粒由无色杆菌Achromobacter sp.的菌液经过提取与纯化得到的，无色杆菌Achromobacter sp.的菌种保藏号为CGMCC N0.3684,其中，从无色杆菌Achromobacter sp.中提取与纯化含有降解苯并[b]荧蒽遗传信息的降解质粒的具体方案为: (1)向体积为500mL的锥形瓶内加入400mL基础培养基、1.0mL微量金属液、0.1mL维生素c溶液，摇匀后作为液体培养基备用；其中基础培养基的组成为=NH4NO3:1.7g.L—1，KH2PO4:1.0g. ΛΚ.2HP04:1.0g.L—1，MgCl2:0.30g. Λ CaCl2.2H20:0.15g.L-1 ;微量金属液的组成为:CoCl2.6H20:55mg. Λ CuCl2:0.35mg. Λ H3BO3:11.0mg. Λ MnCl2.4Η20:45mg.L \ Na2MoO4.2Η20:5.5mg.L1, NiCl2.2Η20:4.5mg.L1, ZnCl2:4.5mg.L 1 ； (2)在超净工作台中向体积为IOOmL的锥形瓶中加入6.0mL浓度为lg/L的苯并[b]荧蒽丙酮溶液，为除去丙酮将锥形瓶开口放置2天； (3)向步骤(2)中的锥形瓶内加入60mL按步骤(I)配制的液体培养基； (4)在超净工作台中挑取无色杆菌Achromobactersp.,将其接种至步骤(3)中的锥形瓶中，在温度为25 30°C、 转速为100r/min的振荡器中培养20 22天； (5)将步骤(4)中的菌液转移到容积为15mL的离心管中，在10000r/min条件下离心IOmin,弃去上清液； (6)向步骤(5)中的离心管中加入IOmLpH值为9.0浓度为0.08M的NaH2PO4缓冲液，旋润振荡5min后再进行超声波振荡15min,在10000r/min条件下离心...

【专利技术属性】
技术研发人员：豆俊峰，王营营，丁爱中，谢恩，杜勇超，
申请(专利权)人：北京师范大学，
类型：发明
国别省市：