本发明专利技术公开了一种抗生素-壳聚糖共价复合物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。该制备方法包括以下步骤：(1)制备壳聚糖和抗生素水溶液，将壳聚糖和抗生素按照摩尔比例为1∶0.5～1∶10混合，加入NaCNBH3，避光搅拌，15℃～30℃反应15～72小时；(2)将步骤(1)所得的水溶液移入截留分子量为1400～10000的透析袋中，透析1～5天，得到透析液；(3)将步骤(2)所得的透析液干燥即得。所得壳聚糖-抗生素共价复合物对肿瘤细胞具有较强的破坏作用，针对肿瘤的种类范围广，有效成分明确。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药
，尤其涉及的是一种抗生素-壳聚糖共价复合物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
恶性肿瘤严重威胁着人类的生命。据第三次全国居民死因调查结果显示，我国肿瘤引起的死亡率在所有病因中居第二位，占17.9%，且发病率呈上升趋势。近20年来，我国肿瘤死亡率上升了 29.42%。在35 59岁的中壮年人群中，肿瘤已列居各类死因之首。目前在全世界乃至中国，癌症已成为导致人类死亡的第二大原因。近几年来，肿瘤化疗取得了相当的进步，肿瘤患者生存时间明显延长，化学类抗肿瘤药在其中起着重要作用。化学类抗肿瘤药物是指作用于DNA化学结构的药物，属于细胞毒类药，包括烷化剂、金属钼络 合物、蒽环类抗肿瘤药物和破坏DNA的抗生素等。常见的抗肿瘤抗生素有多肽类抗生素(如放线菌素D和博来霉素)和蒽醌类抗生素(如阿霉素和盐酸米托蒽醌)，然而以上这些传统的肿瘤药物都存在着特异性差，副作用明显，价格高的缺点。壳聚糖(chitosan)是由自然界广泛存在的几丁质经过脱乙酰作用得到的化合物，在医药、食品、化工、化妆品、水处理、金属提取及回收、生化和生物医学工程广泛应用，链霉素(Sti^ptomycin)是继青霉素后第二个生产并用于临床的一种氨基葡萄糖型抗生素，廉价易得。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对目前临床上传统的肿瘤药物都存在着特异性差，副作用明显，价格高的缺点，提供了一种抗生素-壳聚糖共价复合物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。为解决上述技术问题，本专利技术采取的技术方案之一为:一种壳聚糖-抗生素共价复合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤:(I)制备壳聚糖和抗生素水溶液，将壳聚糖和抗生素按照摩尔比例为1:0.5 I: 10混合，加入NaCNBH3，避光搅拌，15°C 30°C反应15 72小时；(2)将步骤⑴所得的水溶液移入截留分子量为1400 10000的透析袋中，透析I 5天，得到透析液；(3)将步骤(2)所得的透析液干燥，即得。其中步骤(I)所述壳聚糖为本领域常规壳聚糖。所述壳聚糖(chitosan)。所述壳聚糖的制备方法较佳地为:由自然界广泛存在的几丁质(chitin)经过脱乙酰作用制备。所述壳聚糖的化学名称为聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-B-D葡萄糖。其中所述抗生素为本领域常规的抗生素。所述抗生素较佳地为氨基糖苷类抗生素。所述氨基糖苷抗生素是由氨基糖与氨基环醇通过氧桥连接而成的糖苷类抗生素。所述抗生素较佳地为链霉素，卡那霉素或庆大霉素。本专利技术所述抗生素优选地为链霉素。将步骤(I)所述壳聚糖和抗生素水溶液混合形成混合液，所述壳聚糖和抗生素的摩尔比更佳地为1:1 1: 6，最佳地为1: 6。所述反应的时间更佳地为10 48小时，最佳地为24小时。所述反应的温度更佳地为15°C 30°C，最佳地为20°C。其中步骤(I)所述NaCNBH3是温和的还原剂，用来还原链霉素和壳聚糖间的碳氮双键，使反应正向进行，不能用其他的还原剂代替，添加量较佳地为所述抗生素含量的30% 50%，添加量最佳地为30%，所述百分比为质量百分比。其中步骤(2)所述的透析为本领域常规透析方法。所述透析是一种穿过膜的选择性扩散过程，可用于分离分子量大小不同的溶质，低于膜所截留阈值分子量的物质可扩散穿过膜，高于膜截留阈值分子量的物质则被保留在半透膜的另一侧。其中所述透析袋为本领域常规透析袋。其中所述透析袋的截留分子量较佳地为3000 5000，更佳地为3500。其中所述透析的时间更佳地为2 3天，透析时间最佳地为2天。其中步骤(3)所述的干燥为本领域常规干燥方式。所述干燥较佳地为真空冷冻干燥、真空干燥、喷雾干燥、烘干或红外干燥，最佳地为真空冷冻干燥。所述真空冷冻干燥的参数较佳地为:温度_35°C _45°C，真空度20 30Pa，时间36 48小时。为解决上述技术问题，本专利技术采取的技术方案之二为:如上所述的制备方法制备所得的壳聚糖-抗生素共价复合物。所述壳聚糖-·抗生素共价复合物中壳聚糖和抗生素的摩尔比较佳地为1:1 I: 10，更佳地为1:1 1: 6，最佳地为1: 6。为解决上述技术问题，本专利技术采取的技术方案之三为:如上所述的壳聚糖-抗生素共价复合物在制备抗肿瘤药物中的用途。其中所述肿瘤为本领域常规肿瘤。所述肿瘤较佳地包括:白血病，肝癌，肺癌，皮肤癌，胃癌，肝癌，口腔癌或淋巴瘤。本专利技术所述用途较佳地是指将壳聚糖-抗生素共价复合物作为活性成分，与药学上可接受的辅料制成各种剂型的抗肿瘤药物。其中所述药学上可接受的辅料是本领域常规使用的辅料。所述药物辅料是指生产药品和调配处方时所用的赋形剂与附加剂。在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本专利技术各较佳实例。本专利技术所用试剂和原料均市售可得。本专利技术的积极进步效果在于:制备本专利技术所述壳聚糖-抗生素共价复合物的原料易得，合成方法简便易行；经细胞实验证明，所得壳聚糖-抗生素共价复合物对肿瘤细胞具有较强的破坏作用，针对肿瘤的种类范围广，有效成分明确；所述壳聚糖-抗生素共价复合物能够有效提高肿瘤对传统抗生素的敏感性，降低传统抗生素的使用量，并拓展了传统抗生素的应用范围。附图说明图1为壳聚糖-链霉素共价复合物分子量测定图谱。图2为壳聚糖-链霉素共价复合物红外图谱。图3为壳聚糖-链霉素共价复合物的核磁共振C谱。图4为壳聚糖-链霉素共价复合物的核磁共振H谱。图5为壳聚糖-链霉素共价复合物对肿瘤细胞生长的抑制作用效果图，其中A和B分别代表人胃癌细胞SGC7901和BGC823，C代表人结肠癌HT29，D代表人大肠癌Lovo细胞，E、F和G分别代表人肝癌细胞BEL-7402、SMMC-7721和H印G2，H代表人肺癌细胞A549，I代表人食管癌细胞Eca-109，J代表Hela细胞，K代表人皮肤黑色素瘤细胞A375，L代表人骨肉瘤细胞MG63。图6为壳聚糖-链霉素共价复合物对人胃癌细胞SGC7901生长的抑制作用效果图，其中A代表药物作用时间为6h，B代表作用时间为12h，C代表作用时间为24h。图7为不同比例壳聚糖-链霉素共价复合物对人肺癌细胞A549生长的抑制作用，其中A代表壳聚糖-链霉素共价复合物1: 1，B代表壳聚糖-链霉素共价复合物1: 2，C代表壳聚糖-链霉素共价复合物1: 4，D代表壳聚糖-链霉素共价复合物1: 6。图8为不同的壳聚糖-抗生素共价复合物对人肺癌细胞A549生长的抑制作用，其中A代表壳聚糖-乙酰螺旋霉素共价复合物，B代表壳聚糖-克拉霉素共价复合物，C代表壳聚糖-红霉素共价复合物。具体实施例方式以下结合具体实施例，对本专利技术进行详细说明。本专利技术所用试剂和原料均市售可得。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。实施例1取壳聚糖lOOmg，链霉素906mg分别溶于30ml去离子水中，并加入0.744g氰基硼氢化钠(NaCNBH3),置于黑暗处室温搅拌15h，300rpm，将溶液加入拦截分子量为3500Da的透析袋在去离子水中透析2天，真空度30Pa，-45°C，冷冻干燥48h，即得摩尔比1:1的壳聚糖-链霉素共价复合物121mg。经HPLC凝胶分析系统(Waters公司生产)测定，(测试温度25°C，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种抗生素?壳聚糖共价复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备壳聚糖和抗生素水溶液，将壳聚糖和抗生素按照摩尔比例为1∶0.5～1∶10混合，加入NaCNBH3，避光搅拌，15℃～30℃反应15～72小时；(2)将步骤(1)所得的水溶液移入截留分子量为1400～10000的透析袋中，透析1～5天，得到透析液；(3)将步骤(2)所得的透析液干燥，即得。
【技术特征摘要】
1.一种抗生素-壳聚糖共价复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)制备壳聚糖和抗生素水溶液，将壳聚糖和抗生素按照摩尔比例为1: 0.5 1: 10混合，加入NaCNBH3，避光搅拌，15°C 30°C反应15 72小时； (2)将步骤(I)所得的水溶液移入截留分子量为1400 10000的透析袋中，透析I 5天，得到透析液； (3)将步骤(2)所得的透析液干燥，即得。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(I)所述抗生素为庆大霉素或链霉素或卡那霉素。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(I)所述壳聚...
【专利技术属性】
技术研发人员：段金友，母海钵，缪泽鸿，张阿敏，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，中科院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：
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