免疫原性疫苗制造技术

本发明专利技术公开了用作治疗或预防疫苗的包含碳水化合物组分、脂质组分和MUC1肽组分的糖脂肽，其诱导体液免疫应答和细胞免疫应答两者。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】免疫原性疫苗本申请要求于2010年6月12日提交的美国临时申请序列号61/354，076和于2010年12月30日提交的美国专利申请序列号13/002，180的利益，所述专利各自通过引用以其整体并入本文。政府权利声明 本专利技术在由美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)的美国国家癌症研究所(National Cancer Institute)授予的补助号ROl CA088986下由政府支持进行。美国政府在本专利技术中拥有一定权利。背景 大量肿瘤相关碳水化合物抗原(TACA)以糖脂和糖蛋白的形式在人癌细胞上表达。致癌转化细胞的共同特征是寡糖例如Globo-H、LewisY和Tn抗原的过表达。众多研究已显示这种异常糖基化可以促进转移，且因此它与癌症患者的弱存活率强烈关联。作为这些肿瘤相关碳水化合物抗原的特征的差异表达致使其成为用于免疫疗法和癌症疫苗开发的有吸引力的靶。近来，几个一流研究已尝试利用肿瘤相关碳水化合物的差异表达用于开发癌症疫苗(例如Raghupathi, 1996, Cancer Immunol ；43:152-157 ；Musselli 等人,2001，J Cancer Res Clin Oncol ; 127:R20-R26 ;Sabbatini 等人，2000，IntJ Cancer；87:79-85 ；Lo-Man 等人，2004, Cancer Res ；64:4987-4994 ；Kagan 等人，2005,Tmmunol Immunother ；54:424-430)。碳水化合物抗原在人免疫缺陷病毒(HIV)——获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的成因剂的表面上也是丰富的。丙型肝炎病毒(HCV)也已知含有碳水化合物抗原。对于大多数免疫原(包括碳水化合物)，抗体产生取决于两个类型的淋巴细胞B细胞和辅助T细胞的协同相互作用。然而，碳水化合物单独不能激活辅助T细胞，并且因此特征在于弱免疫原性。低亲和力IgM抗体的形成和IgG抗体的不存在体现这种有限的免疫原性。已证明难以克服表征这些抗原的免疫耐受。在激活辅助T细胞的努力中，研究者已使碳水化合物抗原与外源载体蛋白质缀合，所述外源载体蛋白质例如匙孔血蓝蛋白(KLH)或去毒破伤风类毒素(TT)。载体蛋白质增强碳水化合物对于免疫系统的呈递，且供应可以激活T辅助细胞的T表位(一般为12-15个氨基酸的肽片段)。然而，碳水化合物与载体蛋白质的缀合具有几个新问题。缀合化学难以控制，导致产生具有可以影响免疫应答的再现性的在组成和结构方面的含糊性的缀合物。此外，外源载体蛋白质可以引发强B细胞应答，其依次又可以导致针对碳水化合物表位的抗体应答的抑制。当采用自身抗原例如肿瘤相关碳水化合物时，后者特别成问题。此外，用于使碳水化合物与蛋白质缀合的接头可以自身是免疫原性的，导致表位抑制。关于在疫苗中基于脂质和碳水化合物的佐剂/载体的综述，还参见McGeary等人(J.Peptide Sc1.9(7):405-418,2003)。并不令人惊讶地 ，用碳水化合物-蛋白质缀合物癌症疫苗的几个临床试验未能在所有患者中诱导足够强的辅助T细胞应答。因此，需要开发可替代策略用于呈递肿瘤相关碳水化合物表位，其将导致更有效的向IgG抗体的类别转换。这些策略可以证明对于基于其他碳水化合物表位(特别是来自致病病毒例如HIV和HCV的那些)的疫苗开发也是有用的。专利技术概述 本专利技术包括在受试者中生成抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)的方法，该方法包括用糖脂肽(glycolipopeptide)免疫接种受试者,所述糖脂肽包括:包括B细胞表位的至少一种糖基化MUCl糖肽组分；包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的至少一种肽组分；和至少一种脂质组分。在一些方面，ADCC是天然杀伤(NK)细胞介导的。在一些方面，ADCC裂解肿瘤细胞。在一些方面，肿瘤细胞是乳腺癌细胞或上皮癌细胞。在一些方面，ADCC裂解表达MUCl肽序列的细胞。在一些方面，MUCl肽是异常糖基化的。本专利技术包括治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括用糖脂肽免疫接种受试者，所述糖脂肽包括:包括B细胞表位的至少一种糖基化MUCl糖肽组分；包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的至少一种肽组分；和至少一种脂质组分。本专利技术包括减少受试者中的肿瘤负荷的方法，该方法包括用糖脂肽免疫接种受试者，所述糖脂肽包括:包括B细胞表位的至少一种糖基化MUCl糖肽组分；包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的至少一种肽组分；和至少一种脂质组分。本专利技术包括预防受试者中的肿瘤复发的方法，该方法包括用糖脂肽免疫接种受试者，所述糖脂肽包括:包括B细胞表位的至少一种糖基化MUCl糖肽组分；包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的至少一种肽组分；和至少一种脂质组分。本专利技术包括预防受试者中的癌症的方法，该方法包括用糖脂肽免疫接种受试者，所述糖脂肽包括:包括B细胞表位的 至少一种糖基化MUCl糖肽组分；包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的至少一种肽组分；和至少一种脂质组分。在本专利技术的方法的一些方面，癌症或肿瘤是乳腺癌或上皮癌。在本专利技术的方法的一些方面，癌症或肿瘤表达异常糖基化的MUC1。本专利技术包括在受试者中生成针对MUCl表达细胞的细胞毒性T细胞应答的方法，该方法包括用糖脂肽免疫接种受试者，所述糖脂肽包括:包括B细胞表位的至少一种糖基化MUCl糖肽组分；包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的至少一种肽组分；和至少一种脂质组分。在一些方面，MUCl表达细胞是肿瘤细胞。本专利技术包括促进在受试者中的抗MUCl抗体类别转换的方法，该方法包括用糖脂肽免疫接种受试者，所述糖脂肽包括:包括B细胞表位的至少一种糖基化MUCl糖肽组分；包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的至少一种肽组分；和至少一种脂质组分。本专利技术包括免疫接种受试者的方法，该方法包括用糖脂肽免疫接种受试者，所述糖脂肽包括:包括B细胞表位的至少一种糖基化MUCl糖肽组分；包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的至少一种肽组分；和至少一种脂质组分；其中在受试者中诱导特异性结合在肿瘤细胞上表达的MUCl蛋白质的IgG亚型抗体。在本专利技术的方法的一些方面，包括B细胞表位的糖基化MUCl糖肽组分包括在一个或多个丝氨酸和/或苏氨酸残基上的糖基化。在本专利技术的方法的一些方面，包括B细胞表位的糖基化MUCl糖肽组分包括用选自下述的糖残基进行的糖基化:GalNAc、GlcNAc, Gal、NANA、NGNA、岩藻糖、甘露糖和葡萄糖。在本专利技术的方法的一些方面，糖脂肽包括附图说明图19中所示的那些之一。在本专利技术的方法的一些方面，包括B细胞表位的糖基化MUCl糖肽组分是I类MHC限制性表位。在本专利技术的方法的一些方面，包括B细胞表位的糖基化MUCl糖肽组分和/或包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的肽组分包括人MUCl肽序列。在本专利技术的方法的一些方面，包括B细胞表位的糖基化MUCl糖肽组分和/或包括MHC II类限制性辅助T细胞表位的肽组分包括与受试者的内源MUCl序列同源的氨基酸序列。在本专利技术的方法的一些方面，包括B细胞表位的糖基化MUCl糖肽组分和/或包括MHC II类限制性辅助T细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：GJ邦斯，M沃尔费尔特，SJ金德勒，V拉克什米纳拉亚南，PA科亨，
申请(专利权)人：乔治亚大学研究基金公司，梅奥医学教育和研究基金会，
类型：
国别省市：