Primer, probe and kit for fluorescence quantitative PCR, the invention relates to a detection dog leptospirosis nucleic acid, the primers and probes as shown in SEQIDNO.1-4, the kit includes 5xFRET-qPCRStock22 and 5x increased slightly, 22 microliters of Oligo mixture containing the primer and probe the Oligo mixture. The primer and probe of the invention can rapidly, specifically and sensitively detect the pathogenic leptospira.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及致病性狗钩端螺旋体诊断的荧光定量PCR检测引物、探针及试剂盒。此专利技术敏感、特异、快速的扩增感染狗的致病性钩端螺旋体(Leptospira interrogansCanicola CanicolajL.1nterrogans Icterohemorrhagiae IcterohemorrhagiaejL.1nterrogans Pomona Pomona, ^BLkerschneri Grippotyphosa Grippotyphosa),而不扩增非致病性的钩端螺旋体(L.biflexa)的核酸。
技术介绍
钩端螺旋体能引起多种动物和人发病的重要人畜共患病。钩端螺旋体感染的主要现有实验室诊断技术包括:1)临症诊断。钩端螺旋体引起的临症症状不特异,在临床诊断的价值有限;2)病原体分离:此发需要的时间长,而且需要经过特殊训练的专业人才;3)血清学实验检测抗钩端螺旋体的抗体。此技术的局限性是不能对钩端螺旋体进行早期诊断,而且不能有效区别诊断区分钩端螺旋体的感染者、感染后的康复者和接受了疫苗接种者;3)PCR技术检测钩端螺旋体的核酸。钩端螺旋体现有16个种、约38个血清组、超过250个血清型,感染多种宿主。此外,钩端螺旋体的基因的流动性很大,不同株之间的基因序列差异较大。因此,很难有一个单一的PCR方法精确、敏感、快速的检测所有株的钩端螺旋体。现有的PCR方法不能对狗的钩端螺旋体感染起到快速、有效的分子诊断。尤其重要的是,钩端螺旋体的患者的血液、尿液中的钩端螺旋体的数量低,而现在市场上的诊断技术的灵敏度不够。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供 ...
【技术保护点】
一种检测狗钩端螺旋体核酸的荧光定量PCR的引物和探针,其特征在于所述引物和探针的如下:引物:上游引物:?5’?GCTACWGGGATCTACTCTGACAACTC?3’;下游引物:?5’?GGACTACTTACYTTTCCGAATGTGGCT?3’;探针:6?FAM探针:????5’?ATTTCAAACGCCMAAAAAAATCAAGGAAACKCTTA?(6?FAM)?3’;LCRed640?探针:???5‘?(LCRed640)?GGAGCAGCTACAGGARCAACGGATATT?(磷酸建)?3’。
【技术特征摘要】
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