A method for producing recombinant avian beta defensin -2 protein, characterized by containing avian beta defensin -2 recombinant yeast transformants in vitro induced expression: (1) expression induced by positive yeast transformants: the results showed that the cultured cell protein compared with the control group did not induce a. With a size of 4.32kD is very obvious. The protein expression by ultra performance liquid chromatography electrospray tandem mass spectrometry, consistent with the target protein amino acid sequences indicated that the gene has been expressed recombinant avian beta defensin -2 protein has been produced. Compared with the prior art, the invention has the antibacterial and growth promoting activity, is suitable for being used in the animal husbandry production, and has the advantages of low production cost and high production efficiency.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种动物生物医药工程领域的基因的生产方法。
技术介绍
现代畜牧业饲用动物在具有高产性能的同时，对环境应激和病原愈加敏感。特别是在集约化饲养条件下，饲用动物面临更多的应激和病原的侵袭。畜牧生产中迫切需要一种高效、无毒害、无残留的免疫促进剂和生长促进剂，在提高饲用动物抗病力的同时，又能提高饲用动物的生产性能及动物产品的安全，以促进畜牧业的健康发展，降低畜牧生产对人类健康及生态环境的破坏。前人研究发现，防御素具有广谱杀菌活性以及超强的抗微生物作用，且作用机理特殊，微生物不易产生抗性，对肿瘤细胞还有细胞毒性作用，同时也可以作为免疫增强剂用于调节动物机体免疫系统，给人们展现了一条开发理想促生长及免疫促进的新途径。由于动物体天然防御素含量低，直接提取远不能满足需要，且成本高、得率低、工序繁；化学合成可行但成本太高，应用受到局限；随着基因工程技术的发展，通过基因重组技术生产防御素多肽，以满足研究和生产的需要成为可能。目前，防御素的基因工程已是生物医学领域研究的热点。基于防御素的重要生理功能及其在生产实际中具有非常好的应用前景，我们进行了一种重组鸭β -防御素-2...
【技术保护点】
一种重组鸭β?防御素?2蛋白的生产方法，其特征在于，?含鸭β?防御素?2的酵母重组转化子体外诱导表达过程：（1）阳性酵母转化子的诱导表达：挑取经鉴定的阳性酵母转化子接种于3?mL?YPD?液体中，30℃、250?r/min振摇培养过夜；再接种于50?mL?BMGY体培养基中，BMGY包含1wt%酵母抽提物、2?wt?%蛋白胨，1mol/L的?pH为6.0的磷酸钾缓冲液、1.34wt%无酵母氮源、4×10?5wt?%生物素、1%wt甘油，30℃振荡培养24?h，至菌体OD600nm达到2～6?时离心弃去上清，加入25?mL?BMMY?液体培养基，BMMY?液体培养基包含1wt...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张辉华，韩小凤，马保华，毕英佐，马静云，谢青梅，李辰，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：
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