利用量子点检测转基因水稻中Bt蛋白的方法技术

本发明专利技术属于转基因成分的检测技术领域，具体涉及一种利用量子点检测转基因水稻中转Bt蛋白的快速简便检测方法。该方法包括：以抗CrylAb单克隆抗体为一抗，量子点(QDs)标记羊抗兔IgG为二抗，制备得到CdSe/ZnS量子点标记的抗CrylAb蛋白双抗体夹心，建立了检测水稻Bt蛋白的双抗夹心荧光免疫吸附测定法，该方法对CrylAb标准蛋白的浓度最低可检值为9pg/mL，线性检测范围为6～200pg/mL，回收率在91.6～105.9，变异系数在3.0～12.6。本发明专利技术的量子点双抗夹心荧光免疫吸附测定法适合转基因水稻的定量检测，其特点是快速、简单和高灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于作物转基因成分的检测
，具体涉及，本专利技术与ELISA方法相关。
技术介绍
转基因生物的安全评价是转基因生物及其产品市场化和商品化的前提，在安全评价中转基因成分的检测是一项重要内容，建立转基因生物快速、简便、准确的检测方法为安全评价和管理奠定基础。我国对转基因水稻的研究处于世界领先水平，其中，研发的一些抗病、抗虫转基因水稻品系已经申请生产种植用生物安全证书，但由于它们的转基因生物安全问题等一些原因，至今尚未有品系批准商业化生产应用。鉴于转基因水稻技术的成熟以及其产品市场化的趋势，因此建立一种快速、简便的检测Bt蛋白的方法，具有必要性和紧迫性。目前对于转基因成分的检测可从外源基因的核酸和蛋白质两个水平进行。核酸水平的检测，主要针对转入的外源基因的核苷酸序列并根据外源基因与内源基因的同源性设计检测方法，主要采用的方法是PCR扩增，即依据转入外源基因的启动子、目的基因、终止子及表达(重组)载体信息，设计特异性引物，进行聚合酶链式反应，依据产物的有无或多少判断是否为转基因产品。PCR反应具有高灵敏度、高特异性、高效性的特点，是转基因产品初筛阶段的主要检测方法。蛋白检水本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测转基因水稻中CrylAb蛋白的快速简便方法，其特在于如下步骤：(1)抗CrylAb单克隆抗体的制备以CrylAb蛋白为抗原获得兔血清，通过纯化得到抗CrylAb单克隆抗体作为一抗，分泌该单克隆抗体的抗CrylAb单克隆抗体杂交瘤细胞HHX?001保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，其保藏号为CTCC?NO：C201214。(2)CdSe/ZnS量子点标记的羊抗免IgG抗体(即二抗)的制备1)将500μL羊抗免IgG抗体溶液分装成10等份的50μL小管子，保存于?20℃冰箱内，待用时取出一小管，置于4℃冰箱处，备用；2)取25μL?CdSe/ZnS量子点母液，20μL?1?乙基?...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘军安，韩宇，华红霞，邹铅，高美虹，陈长水，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：