【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种致病菌的快速检测方法，尤其涉及一种基于Y -Fe2O3纳米粒子间接富集的NMR食源性致病菌快速检测方法。
技术介绍
基本原理:单克隆抗体或抗原分子与酶分子通过共价键结合，这种结合不会改变单克隆抗体、抗原和酶的免疫学特性及生物活性，特异性的单克隆抗体只会与特异性的抗原结合。其主要的原理步骤:1.向待检样本中加入目标菌的第I抗体，若存在目标菌，则与I抗结合形成I抗复合物；2.利用磁性F-Fe2O3纳米粒子，通过修饰抗体实现表面功能化，将I抗的抗体即2抗偶联在磁珠表面，形成特异性免疫磁珠，并将多余活性位点封闭。2.将另一部分目标菌的特异性I抗单克隆抗体采用一定的方法固定在固相载体表面，并将多余活性位点封闭。3.将第2步制备的2抗特异性免疫磁珠加入到第I步的待检样本中，用于抓取富集目标菌，通过外加磁场将磁珠分离出来，此时，结合了目标菌的I抗复合物和没有结合目标菌的过量I抗都会与磁珠表面的2抗结合，还是混在一起。4.将上述混在一起的磁珠，加到第2步的固相载体表面，则抓取了目标菌的磁珠将与固相载体表面I抗发生特异性结合，形成双抗夹心，用无菌的去离子水清洗可...
【技术保护点】
一种基于γ?Fe2O3纳米粒子间接富集的NMR食源性致病菌快速检测方法，?其特征步骤如下：1）将检测目标菌与目标菌的1抗结合形成1抗复合物；2）检测目标菌的1抗抗体，即2抗特异性免疫磁珠的制备；3）将目标菌1抗特异性单克隆抗体在固相载体上的固定；4）免疫磁珠富集目标菌株，并分离：将第2步制得的2抗免疫磁珠加入到第1步结合了1抗的待检样品，充分混合震荡，抓取目标菌后通过施加外加磁场，则磁珠就汇集到磁场一边，吸走上清液则可以分离出磁珠，若待检样本中有目标菌，目标菌首先与1抗结合形成复合物，在加入2抗磁珠后，通过2抗与1抗的相互作用，从而捕获1抗复合物，被磁珠所富集，加少量无菌的...
【技术特征摘要】
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