【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种提高肌细胞生成素(MyoG是myogenin的缩写)基因启动子活性的方法，属于遗传工程
技术介绍
真核生物的基因表达调控是一个复杂而严密的过程。在转基因动物的研究中，获得能广泛应用的高效特异性的启动子对于外源基因的表达具有十分重要的意义。哺乳动物核心启动子包括TATA盒以及启动子近端元件,位于转录起始位点上游大约200至300bp。广义启动子包括启动子近端元件、增强子和沉默子等所有顺式调控元件，一般至少有2至3kb以上的长度。实际上核心启动子是RNA聚合酶识别和结合，并使基因转录的主要位点。编码蛋白的基因核心启动子主要与通用转录因子II (TFII)结合。通用转录因子II (TFII)的成分TFIID,可识别TATA盒，(又名TATA框、TATA box / Hogness box,位于转录起始位点上游约25bp处)。TF I1-D、B、F及RNA聚合酶II结合形成一个基本的起始复合物，使RNA聚合酶II磷酸化，启动转录，RNA聚合酶可以特异性识别和结合的DNA序列。启动子是基因(gene)的一个组成部分，控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度。启动子(Promoters)就像“开关”，决定基因的活动。既然基因是成序列的核苷酸(nucleotides),那么启动子也应由DNA组成。启动子本身并不控制基因活动，而是通过与称为转录(transcription)因子的这种蛋白质(proteins)结合而控制基因活动的。转录因子就像一面“旗子”，指挥着酶(enzymes) (RNA聚合酶polymerases)的活动。这种酶制造着...
【技术保护点】
一种提高肌细胞生成素（MyoG）基因启动子活性的方法，其特征在于通过克隆MyoG基因5′端调控区长度为2125bp的核酸序列，采用启动子缺失片段活性分析的方法获得1个长度为373bp，且具有较高肌肉特异性启动子活性的较为理想的缺失片段即pGL3?MyoGpro373，该片段是MyoG基因启动子的核心片段，在373bp缺失片段内部通过生物信息学分析结果，又对其内部具有SP1正调控作用的启动子元件进行克隆，并将这两个片段进行串联，即将新克隆的具有SP1正调控作用的启动子元件连接到pGL3?MyoGpro373的373缺失片段之前，从而构建了一个含有两个拷贝数启动子调控元件的表达载体，称为pGL3?MyoGpro373?double，即具有“double”特征的启动子序列，其碱基组成Seq?ID?No:2所示。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李树峰，佟慧丽，严云勤，金慧然，王鑫，李光鹏，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：
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