一种高效还原偶氮染料的基因工程菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种高效还原偶氮染料的基因工程菌及其构建方法和应用。它是将NADH-偶氮还原酶基因及其上游启动子序列与表达载体pET-22b(+)连接，然后再转入大肠杆菌E.coli?BL21(DE3)中，而得到具有双启动子的高效还原偶氮染料的基因工程菌E.coli?BL21(DE3)/azoR，所述的NADH-偶氮还原酶基因为Genebank登录号为EF198254所示的核苷酸序列，所述的NADH-偶氮还原酶基因上游启动子为Genebank登录号为EF647586所示的核苷酸序列。该基因工程菌E.coli?BL21(DE3)/azoR可以在更广温度范围内实现偶氮染料的脱色，具有更强的脱色活性和长期的存活能力，在染料废水处理方面具有更广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及一种高效还原偶氮染料的基因工程菌及其构建方法和应用。
技术介绍
:近年来，随着偶氮染料的广泛使用，其合成及降解过程带来“三致”作用引起的环境污染问题也日渐严重，有关偶氮染料降解的研究也越来越引起人们的重视。自20世纪70年代末发现某些细菌可以还原降解偶氮染料以来，到目前为止已发现多种细菌具有此功能，其中以假单胞菌、芽孢杆菌和肠道杆菌数量最多。细菌对偶氮染料的还原降解主要是通过还原酶催化偶氮键的打开，这是偶氮染料降解的第一步也是最关键的一步，这一类具有催化偶氮键打开使偶氮化合物还原生成芳香胺化合物功能的酶称为偶氮还原酶。脱色希瓦氏菌Shewanella decolorationis S12是本实验室从广州某印染厂废水处理系统的活性污泥中分离纯化得到的希瓦氏菌新种，可以表达细胞质的非特异性偶氮还原酶进行厌氧偶氮还原。但是S.decolorationis S12的生长受温度影响较为明显,在高温如37°C以上或低温15°C以下，其生长均不理想。因此需要构建一种可以在更广温度范围内实现偶氮染料的脱色的工程菌，其具有更强的脱色活性和长期的存活能力，并可应用于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高效还原偶氮染料的基因工程菌的构建方法，其特征在于，将NADH?偶氮还原酶基因及其上游启动子序列与表达载体pET?22b(+)连接，然后再转入大肠杆菌E.coli?BL21(DE3)中，而得到具有双启动子的高效还原偶氮染料的基因工程菌E.coli?BL21(DE3)/azoR，所述的NADH?偶氮还原酶基因为Genebank登录号为EF198254所示的核苷酸序列，所述的NADH?偶氮还原酶基因上游启动子为Genebank登录号为EF647586所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种高效还原偶氮染料的基因工程菌的构建方法，其特征在于，将NADH-偶氮还原酶基因及其上游启动子序列与表达载体pET-22b(+)连接，然后再转入大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中，而得到具有双启动子的高效还原偶氮染料的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/azoR,所述的NADH-偶氮还原酶基因为Genebank登录号为EF1...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈杏娟，许玫英，孙国萍，
申请(专利权)人：广东省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：