本发明专利技术属于基因工程领域，涉及菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因及其植物表达载体和应用。本发明专利技术菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因序列如SEQ?ID?NO.1所示，所构建的表达载体pCAMBIA1301‐（+/‐）‐CmbHLH1是将CmbHLH1基因插入到克隆载体pMD19‐T?simple?vector(Takara)，后经过BamH?I(Takara)和Sac?I(Takara)双酶切后连接到表达载体pCAMBIA1301的BamH?I和Sac?I位点得到的。将该植物表达载体用于植物遗传转化，正反义CmbHLH1基因在CaMV35S启动子的启动下过量表达，从而达到影响下游目的基因的表达效果，提高植物铁离子的吸收能力并进一步验证该基因的功能。菊属中该基因是首次发现与铁离子吸收相关的bHLH转录因子。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程领域，涉及菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因及其植物表达载体和应用。
技术介绍
植物转录因子在植物的生长发育过程中起着重要作用，转录调控过程的研究已成为当今分子生物学的研究重点。bHLH转录因子是植物中第二大类转录因子家族，该家族成员在调控一系列重要的生理过程中发挥着重要作用，例如，调节植物根毛的形成、种子与芽的形态发生、光的形态建成以及植物对激素和外界环境因子响应的反应[I 5].菊花(Chrysanthemum morifolium)是我国十大传统名花和世界四大切花之一,极具观赏价值与经济价值。干旱、盐碱、冻害、病害等胁迫以及栽培土壤中自身营养元素的缺乏是导致菊花品质下降、生产产品不符合标准以及限制其园林应用的主要影响因子。目前，菊花抗逆性育种多依赖于传统的杂交育种，其过程缓慢、耗费人力并且具有不定向性，杂交后代往往不能够符合育种要求。 目前，菊花转录因子的研究还仅限于DREB转录因子、MYB转录因子等少数类型的转录因子[6_8]，还有许多关键的调控转录因子没有被发掘和利用，这严重制约着菊花分子遗传改良及其新品种的选育。鉴于bHLH转录因子在植物生长发育过程中发挥着重要调控作用，控制着一系列重要的生理生化过程，因而对该类转录因子的分子机理研究具有十分重要的意义，对于菊花新品种的选育也具有指导作用。在基因工程育种过程中，通常选用农杆菌介导法将外源基因导入到植物细胞中，其中最关键的就是植物表达载体的构建。将转录因子基因构建植物表达载体，并用农杆菌介导法进行植物遗传转化，使转录因子在CaMV35S启动子的启动下超量表达，达到调控下游目的基因的目的，对于充分发挥该基因的功能、新品种的选育及在生产中的广泛应用都具有深远意义。[l]Yi, K., Menand, B., Bell, E., and Dolan, L.A basic helix - loop - helixtranscription factor controls cell growth and size in root hairs.Naturegenetics.2010，42:264 - 267.[2] Sun, X.，Shantharajj D.，Kang, X.，and Ni，M.Transcriptional and hormonalsignaling control of Arabidopsis seed development.Current opinion in plantbiology.2010，13:611 - 620.[3]Nozue, K.，Covington, M.F.，Duekj P.D.，Lorrainj S.，Fankhauserj C.，HarmerjS.L，and MaloofjJ.N.Rhythmic growth explained by coincidence between internaland external cues.Nature.2007，448:358 - 361.[4] Yadavj V.，Mallappaj C.，Gangappaj S.N.，Bhatiaj S.，and Chattopadhyayj S.A basic helix - loop - helix transcription factor in Arabidopsisj MYC2, acts asa repressor of blue light - mediated photomorphogenic growth.The Plant CellOnline.2005，17:1953 - 1966.[5] Dombrecht, B., Xue, G.P., Sprague, S.J., Kirkegaard, J.A., Ross, J.J., Reid, J.B., Fitt，G.P., Sewel am, N., Schenk, P.M., and Manners, J.M..MYC2differentially modulates diverse jasmonate - dependent functions inArabidopsis.The Plant Cell Online.2007, 19:2225 - 2245.[6] Yanfang Yang, Jian Wu, Kai Zhu, Liqing Liu, Fadi Chen, DeyueYu.1dentification and characterization of two chrysanthemum(DendronthemaXmoriforlium)DREB genes, belonging to the AP2/EREBP family.Molecular BiologyReport.2009, 36:71 - 81.[7]Zheng Tong,Bo Hong, Yingjie Yang, Qiuhua Li, Nan Ma, Chao Ma and JunpingGa0.0verexpression of two chrysanthemum DgDREBlgroup genes causing delayedflowering or dwarfism in Arabidopsis.Plant Molecular Biology.2009, 71:115 -129.[8]Shan Hong, Chen Sumei, Jiang Jiafu, Chen Fadi, Chen Yu, Gu Chunsun, LiPeiling, Song Aiping,Zhu Xirong, Gao Haishun, Zhou Guoqin, Li Ting, Yang Xue.Heterologous expression of the Chrysanthemum R2R3 - MYB transcription factorCmMYB2enhances drought and salinity tolerance, increases hypersensitivity to ABAand delays flowering in Arabidopsis thaliana.Molecular Biotechnology.2012, 51 (2):160 - 173.
技术实现思路
针对
技术介绍
提出的解决提高菊花矿质元素吸收的问题，提供一种新的菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因。本专利技术的另一目的在于该转录因子CmbHLHl基因的植物表达载体。本专利技术的又一目的是提供该基因的应用。本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现:菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因，该基因的序列为SEQ ID N0.1。菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因的植物表达载体，由本专利技术所述的菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因(序列为SEQ ID N0.1)与中间植物表达载体pCAMBIA1301构成。上述的菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因的植物表达载体，是由BamH I和Sac I双酶切CmbHLHl后插入到pCAMBIA1301表达载体质粒进行连接反应得到。本文档来自技高网...
【技术保护点】
菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因，其特征在于该基因的序列为SEQ?ID?NO.1。
【技术特征摘要】
1.菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因，其特征在于该基因的序列为SEQID N0.1。2.含菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因的植物表达载体，其特征在于由权利要求1所述的菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因与植物表达载体构成。3.根据权利要求2所述的含菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因的植物表达载体，其特征在于所述的植物表达载体是将CmbHLHl基因插入pCAMBIA1301表达载体的BamH I和Sac I酶切位点所得。4.权利要求2或3所述的菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因植物表达载体的构建方法，其特征在于包括如下步骤: 1)菊花bHLH转录因子CmbHLHl基因的克隆 设计引物以菊花‘钟山紫桂’ cDNA为模板，利用PCR反应扩增上、下游分别含BamHI和Sac I酶切位点的CmbHLHl基因；其中使用的引物序列为=CmbHLHl-Sense-F:SEQ ID N0.4，CmbHLHl-Sense-R:SEQ ID N0.5，CmbHLHl-Antisense-F:SEQ ID N0.6,Cmb...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈发棣，赵民，蒋甲福，陈素梅，李佩玲，宋爱萍，房伟民，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。