云南红梨PyMYB基因及其原核表达载体和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种云南红梨色素合成调控和毛状体发生发育调控蛋白PyMYB基因及其原核表达载体，及原核表达载体的应用；本发明专利技术利用RT-PCR技术从云红梨1号红色果皮中克隆PyMYB基因，然后再利用原核表达载体将该基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达，采用GST凝胶柱纯化法纯化，获得云南红梨PyMYB纯化蛋白，云南红梨PyMYB纯化蛋白用于制备PyMYB特异性抗体和其在PyMYB蛋白表达检测中及免疫沉淀、染色质免疫共沉淀和融合蛋白沉降实验中的应用；本发明专利技术中所制备的抗体特异性强，能够准确的检测PyMYB蛋白的亚细胞定位、用于免疫共沉淀实验中验证蛋白互作、高效分离PyMYB蛋白所结合的蛋白和DNA片段及检测其在转基因植物中的表达情况。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种云南红梨色素和毛状体发生发育调控蛋白基因PyMYB及其原核表达载体，和原核表达载体和PyMYB抗体的应用。
技术介绍
红色表皮是梨分子育种的重要性状指标。云南省因其独特的地理和气候条件而拥有较多的红皮梨种质资源，1986年以来先后已选育出早白蜜、美人酥、满天红和云红梨I号四个栽培品种。但生产中除云红梨I号外，其它3个品种都会因气候变化而导致着色较差甚至不着色，因此需要研究红梨果皮的着色机理。已有研究表明植物花青素的合成是由转录复合物MYB/bHLH/ WD40调控的。前人对MYB研究表明，在拟南芥中，MYB转录因子PAP1/MYB75通过调控拟南芥花青素生物合成途径中的关键酶调控花青素的合成；拟南芥tt (TRANSPARENT TESTA)突变体中，类黄酮生物合成途径的许多步骤都是由MYB_bHLH复合物调控的，该复合物主要催化黄酮醇合成级联反应中的查尔酮合酶(CK )、查尔酮异构酶W/)、二氢黄酮醇还原酶(/ )和黄酮醇合酶0 )基因都是在光应答下协同表达的；油菜中过表达拟南芥MYB转录因子PAPl，导致叶片中酚类化合物大幅度的上升本文档来自技高网...

【技术保护点】
云南红梨PyMYB基因，其特征在于：PyMYB基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示或编码如SEQ?ID?NO：4所示的氨基酸序列的蛋白质。

【技术特征摘要】
1.云南红梨基因，其特征在于沒基因的核苷酸序列如SEQID N0:3所示或编码如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的蛋白质。2.权利要求1所述云南红梨/>#7沒基因的原核表达载体pGEX-4T-/y#7凡其特征在于:该载体含有招基因，上游有Ptac启动子和细菌核糖体结合位点RBS，P...

【专利技术属性】
技术研发人员：李昆志，崔道雷，张晓东，樊磊，陈丽梅，舒群，苏俊，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：