一种珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法技术

本发明专利技术提供了一种珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法，它包括获得珊瑚菜无菌苗；培养供感染用的发根农杆菌；转化外植体进行共培养；诱导毛状根发生和毛状根的培养增殖。本发明专利技术利用发根农杆菌感染诱导珊瑚菜毛状根的形成，建立离体毛状根培养系统，并分析测定了其药用成分香豆素的含量，与不定根和人工栽培的珊瑚菜根中香豆素的含量进行了对比，以毛状根中香豆素的含量最高，本发明专利技术中珊瑚菜毛状根具有生长迅速，周期短，次级代谢产物相对产量高等优点，可用于工业化生产珊瑚菜香豆素；为将来利用毛状根工业化生产珊瑚菜次级代谢产物提供了新的途径，从另一方面保护该濒危植物，有利于维护生态平衡。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物组织培养领域，尤其涉及。
技术介绍
植物组织培养包括器官培养、愈伤组织培养、茎尖组织培养、细胞培养、原生质体培养等。其中愈伤组织培养最常见，因为除茎尖分生组织培养和少数器官培养外，其它类型都要经历愈伤组织阶段才能产生再生植株，其原理是利用植物细胞的全能性，愈伤组织的形成在组织培养技术中有着至关重要的地位，许多药用植物中的活性成分可直接通过愈伤组织进行合成。珊瑚菜是生长在北太平洋沿海地区沙滩地的一种伞形科多年生草药。在我国分布于辽宁、山东、江苏等地，生长于海边沙滩或人工栽培，原为海滩沙生植物群落的建群种之一，对海岸固沙和盐碱土改良具重要作用，但随着海滩的滥用开发和对该植物的过度采挖，使其数量日趋减少，已经处于濒临灭绝的境地，被列为中国珍稀濒危保护植物。而人工栽培技术要求高，种子萌发率低，生长周期长，掠夺式的采集野生资源又会危及生态平衡。珊瑚菜具有较高的药用价值，其根状茎和根可作生药，被收入日本和中国药典。珊瑚菜根(北沙参)中含有多种香豆素和香豆素苷，主要有欧前胡素、异欧前胡素、佛手柑内酯、佛手素、花椒毒酚、花椒毒素、补骨脂素、东莨菪素、紫花前胡苷元等。其中补骨脂素、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法，其特征在于它包括以下步骤：?（1）获得珊瑚菜无菌苗；（2）培养供感染用的发根农杆菌；（3）转化外植体进行共培养：取长势较好的珊瑚菜无菌苗，切取根、叶柄或叶片作为外植体，在其表面划出伤口用于感染，放入发根农杆菌菌液中浸泡，然后放入MS固体培养基中共培养，直至外植体周边出现菌斑；?（4）诱导毛状根发生：将出现菌斑的外植体清洗后，放入含有头孢噻肟钠的1/2MS培养基中培养，定期更换1/2MS培养基，在更换的培养基中逐步降低头孢噻肟钠的浓度，直到在完全除掉头孢噻肟钠的1/2MS培养基中继续培养，获得除菌的毛根系；?（5）毛状根的培养增殖：将除菌完全、生长快速的毛状根接种...

【技术特征摘要】
1.一种珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法，其特征在于它包括以下步骤: (1)获得珊瑚菜无菌苗； (2)培养供感染用的发根农杆菌； (3)转化外植体进行共培养:取长势较好的珊瑚菜无菌苗，切取根、叶柄或叶片作为外植体，在其表面划出伤口用于感染，放入发根农杆菌菌液中浸泡，然后放入MS固体培养基中共培养，直至外植体周边出现菌斑； (4)诱导毛状根发生:将出现菌斑的外植体清洗后，放入含有头孢噻肟钠的1/2MS培养基中培养，定期更换1/2MS培养基，在更换的培养基中逐步降低头孢噻肟钠的浓度，直到在完全除掉头孢噻肟钠的1/2MS培养基中继续培养，获得除菌的毛根系； (5)毛状根的培养增殖:将除菌完全、生长快速的毛状根接种在1/2MS液体培养基中，振荡培养增殖，获得大量毛状根。2.根据权利要求1所述的珊 瑚菜毛状根的诱导增殖方法，其特征在于:所述步骤(I)中选择饱满的珊瑚菜种子，灭菌，后接种于MS固体培养基中培养获得无菌苗。3.根据权利要求1所述的珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法，其特征在于:所述步骤(2)中所用菌种为发根农杆菌1.2556。4.根据权利要求1或3所述的珊瑚菜毛状根的诱导增殖方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛华，马蓓蓓，刘汉柱，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：