一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法技术

技术编号:8761218 阅读:187 留言:0更新日期:2013-06-06 22:59
本发明专利技术公开了一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法,可用于引起菌核病的核盘菌的早期预警和流行监测。该方法利用所述的两对引物在63℃进行恒温扩增,观察扩增产物其颜色变化,进行是否是核盘菌菌株的鉴定;如果扩增颜色显示天蓝色(有产物扩增)为核盘菌菌株,如果显示紫色(无产物扩增)为非核盘菌菌株。本发明专利技术实现了恒温扩增,不需要昂贵的仪器设备、繁琐的电泳过程,使检测时间和成本大大降低。与普通PCR相比,本发明专利技术还具有灵敏度高、特异性强、检测准确性高等特点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法,其特征在于基于环介导恒温扩增技术(LAMP)对核盘菌进行快速鉴定,该方法共分三步:?(1)运用引物的特异性进行LAMP恒温扩增,环介导恒温扩增技术(LAMP)反应体系及参数:?反应体系:?反应参数:63℃?45min,80℃?10min;?(2)对上述LAMP扩增产物观察其颜色变化,并在3.0%琼脂糖凝胶电泳上分离,观察扩增结果;?(3)鉴定是否为核盘菌菌株;如果LAMP扩增产物显示天蓝色,这时电泳图谱应为梯状条带,判定为核盘菌菌株;如果扩增产物为紫色,这时电泳图谱无条带扩增,判定为非核盘菌菌株。?FSA00000858646600011.tif

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:周明国段亚冰葛常艳张晓柯
申请(专利权)人:南京农业大学
类型:发明
国别省市:

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