以改性核桃壳为载体的固定化脂肪酶的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种以改性核桃壳为载体的固定化脂肪酶的制备方法，首先利用核桃壳制备出活性炭，接着对制备出的活性炭进行改性处理，然后与脂肪酶液混合进行固定化处理制得固定化脂肪酶；本方法采用的核桃壳具有原料易得，价格低廉的特点，同时本方法工艺简单，操作成本低，制得的固定化酶具有良好的稳定性，反应酶活高，能反复多次使用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
以改性核桃壳为载体的固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）核桃壳活性炭的制备：将核桃壳粉碎，按固液比为1:2?5的比例向核桃壳中加入质量百分比浓度为20?60%的活性剂，在40?60℃的条件下浸渍20?30h，然后将浸渍后的核桃壳置于马弗炉中，先在300?400℃的条件炭化60?120min，然后在500?700℃的条件下活化30?90min，取出核桃壳用盐酸溶液清洗2?3次后再用去离子水洗涤至中性，即得核桃壳活性炭，烘干备用；（2）核桃壳活性炭的硅烷化处理：按每克核桃壳活性炭添加3?4ml环己烷和0.02?0.04?mL硅烷化试剂的比例，在核桃壳活性炭中加入环己烷和硅烷化试剂，充分混匀后，在温度为50?70℃条件下振荡1?2h，待反应结束后，过滤，滤渣用环己烷洗涤，烘干，粉碎分筛至20?120目，即得改性核桃壳；?（3）脂肪酶的固定化：按给酶量为5?25mg/g的比例向脂肪酶溶液中加入20?120目改性核桃壳，密封，在20?40℃下振荡固定1?5h后，抽滤，滤渣用缓冲液洗涤直至没有蛋白洗脱下来，然后冷冻干燥，即得到固定化脂肪酶。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：余旭亚，邓涛，夏雪山，游金坤，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：