产生自然杀伤细胞的方法技术

本文提供了使用两步扩增和分化方法产生自然杀伤细胞的方法。本文还提供了抑制肿瘤细胞增殖、治疗患有癌或病毒感染的个体的方法，包括将通过所述方法产生的NK细胞施用给患有癌或病毒感染的个体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本文提供了产生自然杀伤细胞群体的方法，例如，来源于胎盘的自然杀伤细胞，例如，来源于胎盘灌洗液(例如，人胎盘灌洗液)，如胎盘源中间体自然杀伤细胞，或者来源于其他组织，例如，脐带血或外周血。本文还提供了通过本文所提供的方法产生的扩增的自然杀伤细胞群体。本文还提供了使用胎盘灌洗液以及来自所述胎盘灌洗液的自然杀伤细胞抑制肿瘤细胞增殖的方法。在某些实施方式中，将所述自然杀伤细胞与一种或多种免疫调节化合物(例如，称为IMiD 的免疫调节化合物)组合使用或用所述一种或多种免疫调节化合物处理。3.
技术介绍
自然杀伤(NK)细胞是构成天然免疫系统的主要部分的细胞毒性淋巴细胞。NK细胞不表达T细胞抗原受体(TCR)、CD3或表面免疫球蛋白(Ig) B细胞受体。NK细胞通常在人中表达表面标志物⑶16 (FcyRIII)和⑶56，但人NK细胞的亚类为⑶16。NK细胞是细胞毒性的；它们细胞质中的微粒含有特殊的蛋白质，如穿孔素和被称为颗粒酶的蛋白酶。一旦在要杀伤的靶细胞附近释放，则穿孔素在所述靶细胞的细胞膜中形成孔，通过该孔颗粒酶和结合分子可以进入，从而引起细胞凋亡。一种颗粒酶，颗粒酶B (也称为颗粒酶2和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.13 US 61/363,981;2011.06.16 US 61/497,8971.种产生激活的自然杀伤(NK)细胞群体的方法，包括: Ca)将造血干细胞或祖细胞群体接种到包含白细胞介素-15 (IL-15)并可选地包含干细胞因子(SCF)和白细胞介素-7 (IL-7)中的一种或多种的第一培养基中，其中所述IL-15和可选的SCF和IL-7不包含在所述培养基的不明确的组分中，从而所述群体扩增并且所述造血干细胞或祖细胞群体内的多个造血干细胞或祖细胞在所述扩增期间分化为NK细胞；和 (b )将来自步骤(a)的所述细胞在包含干扰白细胞素-2 (IL-2)的第二培养基中扩增，以产生激活的NK细胞群体。2.种产生激活的自然杀伤(NK)细胞群体的两步法，其中，所述方法的第一步包括在包含干细胞因子(SCF)、白细胞介素-7 (IL-7)和白细胞介素-15 (IL-15)中的一种或多种的第一培养基中扩增造血干细胞或祖细胞群体，并且其中所述SCF、IL-7和IL-15不包含在所述培养基的不明确的组分中，并且其中所述造血干细胞或祖细胞群体内的多个造血干细胞或祖细胞在所述扩增期间分化为NK细胞；和 其中所述方法的第二步包括在包含干扰白细胞素-2 (IL-2)的第二培养基中扩增来自所述第一步的细胞，以产生激活的NK细胞。3.据权利要求1所述的方法，其中，所述第一培养基还包含Fms样酪氨酸激酶3配体(Flt3-L)、促血小板生成素(Τρο)、白细胞介素-2 (IL-2)或肝素中的一种或多种。4.据权利要求3所述的方法，其中，所述第一培养基还包含胎牛血清或人血清。5.据权利要求3所述的方法，其中，所述SCF在所述第一培养基中以约I至约150ng/mL的浓度存在。6.据权利要求3所述的 方法，其中，所述Flt3-L在所述第一培养基中以约I至约150ng/mL的浓度存在。7.据权利要求3所述的方法，其中，所述IL-2在所述第一培养基中以约50至约1500IU/mL的浓度存在。8.据权利要求3所述的方法，其中，所述IL-7在所述第一培养基中以约I至约150ng/mL的浓度存在。9.据权利要求3所述的方法，其中，所述IL-15在所述第一培养基中以约I至约150ng/mL的浓度存在。10.据权利要求3所述的方法，其中，所述Tpo在所述第一培养基中以约I至约150ng/mL的浓度存在。11.据权利要求3所述的方法，其中，所述肝素在所述第一培养基...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗伯特·J·哈黎里，穆罕默德·A·黑德兰，斯蒂芬·亚什科，康琳，埃里克·劳，阿贾伊·帕尔，芭娃妮·斯托特，瓦内萨·沃斯基纳里安贝尔斯，安德鲁·查特林，张小葵，
申请(专利权)人：人类起源公司，
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