【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种致病菌的快速检测方，尤其涉及一种基于r_ Fe2O3OAu复合纳米探针的NMR食源性致病菌快速检测方法。
技术介绍
基本原理:单克隆抗体或抗原分子与酶分子通过共价键结合，这种结合不会改变单克隆抗体、抗原和酶的免疫学特性及生物活性，特异性的单克隆抗体只会与特异性的抗原结合。其主要的原理步骤:1.利用种子生长法制备了磁性r_ Fe2O3OAu核壳纳米粒子，通过修饰抗体实现表面功能化，将单克隆抗体偶联在磁珠表面，形成特异性免疫磁珠，并将多余活性位点封闭。2.将另一部分目标菌的特异性单克隆抗体采用一定的方法固定在固相载体表面，并将多余活性位点封闭。3.将制备的特异性免疫磁珠用于抓取富集目标菌，通过外加磁场将磁珠分离出来，此时，结合了目标菌的磁珠和没有结合目标菌的磁珠还是混在一起。4.将上述混在一起的磁珠，加到第2步的固相载体表面，则抓取了目标菌的磁珠将与固相载体表面单克隆抗体发生特异性结合，形成双抗夹心，用无菌的去离子水清洗可以将未发生结合的磁珠洗脱。5.再采用洗脱剂将固定载体上的结合的特异性纳米免疫磁珠洗下来，清洗掉离子、溶剂。此部分磁珠如果存在，就...
【技术保护点】
一种基于γ??Fe2O3@Au复合纳米探针的NMR食源性致病菌快速检测方法，其特征步骤如下：1）检测目标菌的特异性免疫磁珠的制备；2）将目标菌特异性单克隆抗体在固相载体上的固定；3）免疫磁珠富集目标菌株，并分离：将第1步制得的免疫磁珠加入待检样品，充分混合震荡，抓取目标菌后通过施加外加磁场，则磁珠就汇集到磁场一边，吸走上清液则可以分离出磁珠，若待检样本中有目标菌，则被磁珠所富集，加少量无菌的去离子水则形成目标菌的磁珠悬浊液；4）将富集的磁珠悬浊液加到第2步固定了单克隆抗体的固相载体上，若存在目标菌则形成双抗夹心，用无菌的去离子水清洗，则没有抓取到目标菌的磁珠就被洗掉，若不存...
【技术特征摘要】
1.一种基于r_ Fe2O3OAu复合纳米探针的NMR食源性致病菌快速检测方法，其特征步骤如下: 1)检测目标菌的特异性免疫磁珠的制备； 2)将目标菌特异性单克隆抗体在固相载体上的固定； 3)免疫磁珠富集目标菌株，并分离:将第I步制得的免疫磁珠加入待检样品，充分混合震荡，抓取目标菌后通过施加外加磁场，则磁珠就汇集到磁场一边，吸走上清液则可以分离出磁珠，若待检样本中有目标菌，则被磁珠所富集，加少量无菌的去离子水则形成目标菌的磁珠悬池液； 4)将富集的磁珠悬浊液加到第2步固定了单克隆抗体的固相载体上，若存在目标菌则形成双抗夹心，用无菌的去离子水清洗，则没有抓取到目标菌的磁珠就被洗掉，若不存在目标菌，则所有磁珠都被洗掉； 5)之后，用洗脱剂将固定板上的双抗夹心的磁珠洗下来，用外加磁场分离磁珠的方法用无菌的去离子水清洗掉离子和溶剂，如果还存在磁珠就是抓到目标菌的磁珠； 6)这部分磁珠，加入无菌的去离子水形成磁珠的悬浊液，进行核磁共振的弛豫时间测定，在固定场强下，无菌的去离子水的T1/T2是一个恒定值，以无菌的去离子水为空白，测得的悬浊液的弛...
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