尿微量白蛋白检测方法和试剂盒技术

技术编号:8681196 阅读:247 留言:0更新日期:2013-05-09 01:16
本发明专利技术涉及尿微量白蛋白检测方法和试剂盒。一种检测尿微量白蛋白的方法,包括以下步骤:(1)用pH5.0~8.2的含有金属离子的缓冲液和微量白蛋白配制尿微量白蛋白浓度不同的多个标准溶液;(2)在多个标准溶液中加入等量的菁染料和含有金属离子的缓冲液,得到多个标准比色溶液;(3)在待测液体样品中加入菁染料和含有金属离子的缓冲液,以使待测样品中菁染料的浓度以及pH值与标准比色溶液的相同,从而得到测试溶液;(4)将测试溶液与步骤(2)中获得的标准比色溶液的颜色进行对比,从标准比色溶液中找出与测试溶液的颜色一致或接近的标准比色溶液,则该标准比色溶液所对应的标准溶液的尿微量白蛋白浓度与待测液体的尿微量白蛋白浓度一致或接近。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域,具体而言涉及ー种尿微量白蛋白检测方法和试剂盒以及系统。
技术介绍
微量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。白蛋白是ー种血液中的正常蛋白质,但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。尿微量白蛋白的增高多见于糖尿病肾病、高血压、妊娠子痫前期,是肾损伤的早期敏感指标。通常应用尿微量蛋白指标来监测肾病的发生。尿微量蛋白的检测是早期发现肾病最敏感、最可靠的诊断指标。尿微量白蛋白是评估肾脏受损程度:当发现尿微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范围内,尿常规尿蛋白的显示为阴性(_)或(+_),就属于微量白蛋白尿,这个时候说明肾脏已经损伤,如果患者能够经过规范的修复肾単位,逆转纤维化治疗,尚可彻底修复肾小球,消除蛋白尿。而当尿中微量白蛋白超过200mg/L时,尿常规测试尿蛋白阳性(+广(+++),此时证明机体已有大量白蛋白漏出,可能出现低蛋白血症,如果不及时进行医治,就会进入尿毒症期。微量白蛋白尿也是整个血管系统改变的征象,并可认为是动脉病变的“窗ロ”,因为它是肾脏和心血管系统改变的早期指征。通过尿微量白蛋白的数值,结合发病情况、症状以及病史陈述就可以较为准确的诊断病情。判断病情进入了纤维化那个阶段。所以,定期检测尿微量白蛋白(U-MA),普通人应当每年一次,而已增高的患者应每3个月测试一次。这样,对于肾病的预防及早期治疗都起的了积极作用。现有技术中测定尿微量白蛋白的方法主要有:放射免疫法、ELASA法等。放射免疫法最早用于测定尿微量白蛋白,随后免疫透射比浊法、酶联免疫測定等方法相继应用。但是,放射免疫利用放射性同位素作为示踪剂,影响操作人员的身体健康,并严重污染环境。其它的检测方法也具有仪器试剂条件等限制而难以推广的特点。
技术实现思路
本专利技术的目的:提供ー种利用菁染料超分子体系半定量检测溶液中尿微量白蛋白浓度范围的新方法,以及应用该方法配制而成的尿微量白蛋白浓度检测试剂盒。利用该试剂盒中的试剂,可通过溶液的顔色判断样品中的尿微量白蛋白浓度范围,实现可视化检测。本专利技术的总体技术路线为:通过加入菁染料超分子体系与尿微量白蛋白作用,随之菁染料聚集体发生转变,从而反映出尿微量白蛋白的浓度水平。本专利技术的提供一种检测溶液中尿微量白蛋白浓度范围的方法,所述方法包括以下步骤:(I)用PH5.0 8.2的含有金属离子的缓冲溶液和尿微量白蛋白配制尿微量白蛋白浓度不同的多个标准溶液;(2)在所述多个标准溶液中加入等量的菁染料和含有金属离子的缓冲溶液,得到多个标准比色溶液;(3)在待测液体样品中加入菁染料和含有金属离子的缓冲溶液,以使待测样品中菁染料的浓度以及PH值与标准比色溶液的相同,从而得到测试溶液;(4)将测试溶液与步骤(2)中获得的标准比色溶液的顔色进行对比,从标准比色溶液中找出与测试溶液的顔色一致或接近的标准比色溶液,则该标准比色溶液所对应的标准溶液的尿微量白蛋白浓度与待测液体的尿微量白蛋白浓度一致或接近。 本专利技术的方法可以方便地用于半定量地检测各种溶液样品中的尿微量白蛋白浓度范围。根据本专利技术的方法,其中所述含有金属离子的缓冲液可以选自磷酸钾-磷酸氢钾缓冲液、磷酸钠-磷酸氢钠缓冲液、巴比妥钠-盐酸缓冲液、巴比妥钾-盐酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钾缓冲液、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液、硼砂-氢氧化钠缓冲液、磷酸钠缓冲液,或者可以选自添加有水溶性碱金属盐或碱土金属盐的以下缓冲溶液:三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液、三こ醇胺缓冲液、咪唑-盐酸缓冲液、双甘氨肽缓冲液、2-氨基-2-甲基-1-丙醇缓冲液。根据本专利技术方法,其中所述水溶性碱金属盐包括,但不限于氯化钾、硫酸钾、硝酸钾、氯化钠、溴化钠、碘化钠、硫酸钠、硝酸钠等,所述水溶性碱土金属盐包括,但不限于氯化镁、溴化镁、硝酸镁、氯化钙、溴化钙、硝酸钙等。根据本专利技术方法,所述水溶性金属盐在缓冲溶液中的浓度在I 50mmol/L的范围,优选在l(T20mmol/L的范围。根据本专利技术方法,其中所述菁染料为下式I的化合物本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种检测尿微量白蛋白的方法,所述方法包括以下步骤:(1)用pH5.0~8.2的含有金属离子的缓冲溶液和微量白蛋白配制尿微量白蛋白浓度不同的多个标准溶液;(2)在所述多个标准溶液中加入等量的菁染料和含有金属离子的缓冲溶液,得到多个标准比色溶液;(3)在待测液体样品中加入菁染料和含有金属离子的缓冲溶液,以使待测样品中菁染料的浓度以及pH值与标准比色溶液的相同,从而得到测试溶液;(4)将测试溶液与步骤(2)中获得的标准比色溶液的颜色进行对比,从标准比色溶液中找出与测试溶液的颜色一致或接近的标准比色溶液,则该标准比色溶液所对应的标准溶液的尿微量白蛋白浓度与待测液体的尿微量白蛋白浓度一致或接近。

【技术特征摘要】
1.一种检测尿微量白蛋白的方法,所述方法包括以下步骤: (1)用pH5.0 8.2的含有金属离子的缓冲溶液和微量白蛋白配制尿微量白蛋白浓度不同的多个标准溶液; (2)在所述多个标准溶液中加入等量的菁染料和含有金属离子的缓冲溶液,得到多个标准比色溶液; (3)在待测液体样品中加入菁染料和含有金属离子的缓冲溶液,以使待测样品中菁染料的浓度以及PH值与标准比色溶液的相同,从而得到测试溶液; (4)将测试溶液与步骤(2)中获得的标准比色溶液的顔色进行对比,从标准比色溶液中找出与测试溶液的顔色一致或接近的标准比色溶液,则该标准比色溶液所对应的标准溶液的尿微量白蛋白浓度与待测液体的尿微量白蛋白浓度一致或接近。2.按权利要求1所述的方法,其中所述菁染料为式I的化合物,3.按权利要求2所述的方法,其中所述C1-C6的烷基选自甲基、こ基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基或异己基。4.按权利要求2所述的方法,其中R1选自甲基、こ基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基、异己基、苯基、甲基苯基或ニ甲基苯基;R2、R3> R4和R5独立地选自甲基、こ基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戍基、异戍基、正己基或异己基。5...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙红霞唐亚林杨千帆管爱娇
申请(专利权)人:中国科学院化学研究所
类型:发明
国别省市:

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