一种N-乙酰葡萄糖胺异构酶在生产N-乙酰甘露糖胺中的应用制造技术

技术编号:8677970 阅读:320 留言:0更新日期:2013-05-08 22:26
本发明专利技术公开了一种氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示的N-乙酰葡萄糖胺异构酶在催化合成N-乙酰甘露糖胺中的应用。即以氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示的N-乙酰葡萄糖胺异构酶为催化剂,以N-乙酰葡萄糖胺为底物,制备N-乙酰甘露糖胺。本发明专利技术首次将氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示的N-乙酰葡萄糖胺异构酶应用于N-乙酰甘露糖胺制备中,取得很好的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,涉及一种N-乙酰葡萄糖胺异构酶(N-acety lglucosamine 2-epimerase, AGE)的应用,尤其涉及一种来自海藻Prochlorococcus marinus str.MIT9215 中的 N-乙酸葡萄糖胺异构酶(PmAGE)在以N-乙酰葡萄糖胺(N-acetyl-D-glucosamine, GlcNAc)为底物生产N-乙酰甘露糖胺(N-acety 1-D-mannosamine, ManNAc)中的应用。
技术介绍
N-乙酸甘露糖胺(N-acetyl-D-mannosamine,ManNAc)是一种重要的中间体,可用于抗流感药物前体及婴幼儿奶粉添加剂N-乙酰神经氨酸(N-acetyl-D-neuraminicacid, Neu5Ac)的合成。以N-乙酰葡萄糖胺(N-acetyl-D-glucosamine, GlcNAc)为底物用于合成 ManNAc,再以ManNAc和丙酮酸为底物经N-乙酰神经氨酸缩合酶(N-acetylneuraminic acidlyase, Nal)催化合成N-乙酰神经氨酸是目前最主要的合成Neu5Ac本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示的N?乙酰葡萄糖胺异构酶在催化N?乙酰葡萄糖胺合成N?乙酰甘露糖胺中的应用。

【技术特征摘要】
1.一种氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的N-乙酰葡萄糖胺异构酶在催化N-乙酰葡萄糖胺合成N-乙酰甘露糖胺中的应用。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,以氨基酸序列如SEQID N0:2所示的N-乙酰葡萄糖胺异构酶为催化剂,以N-乙酰葡萄糖胺为底物,不需要ATP作为辅因子,制备N-乙酰甘露糖胺。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,表达基因序列如SEQID NO:1所示的重组菌,经过破碎与镍柱纯化后,将纯酶与N-乙酰葡萄糖胺在缓冲液中反应得到N-乙酰甘露糖胺。4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,基因序列如SEQID NO:1所示的重组菌的构建方法如下:以Prochlorococcus marinus str.MIT9215基因组为模板扩增出N-乙酰葡萄糖胺异构酶的基因并连接到pET-28a载体上,再将重组质粒转化入E.coliRosetta (DE3)中。5....

【专利技术属性】
技术研发人员:应汉杰季雯燕谢婧婧孙梧进陈勇陈晓春吴菁岚
申请(专利权)人:南京工业大学
类型:发明
国别省市:

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