一种可用于高效生产角质酶的角质酶基因及其应用制造技术

本发明专利技术公开一种可用于高效生产角质酶的角质酶基因及其应用，特别是一种人工的角质酶基因编码基因及其应用。将编码角质酶基因进行合成优化得到tfu，并在N端人为添加α-factor信号肽及kozark序列。本发明专利技术成功实现了人工的角质酶基因在酿酒酵母中的表达。另外，本发明专利技术结合重组菌株表达体系中启动子的优化，构建出具有产酶和性能都较好的工程菌，为后续角质酶的工业化生产奠定了一定的理论基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及ー种可用于高效生产角质酶的角质酶基因及其应用，特别是ー种人工的角质酶基因编码基因。
技术介绍
角质酶是ー种可以降解角质并产生大量脂肪酸単体的水解酶，角质酶来源很广，存在于植物花粉和多种微生物中。根据来源，角质酶可分为真菌角质酶、细菌角质酶和花粉角质酶。与真菌角质酶相比，细菌角质酶具有催化效率高、环境适应能力强、基因工程异源表达技术成熟等方面的优势。本专利技术选用细菌角质酶作为表达的目的基因。目前，国内重组发酵 生产角质酶大多选用大肠杆菌为表达宿主，这不利于角质酶在食品和医药等行业中的应用。本专利技术为了进ー步拓展角质酶的应用领域，更好地用于食品和医药行业中，研究选用食品级菌株酿酒酵母来表达细菌角质酶。相对大肠杆菌，酿酒酵母具有诸多优点:(I)在重组蛋白的生物生产中，以真核生物作为宿主菌，最显著的优势就是能够进行翻译后修饰，比如こ酰化、磷酸化、糖基化等，这些均是ー些真核蛋白质具有生物活性的必需反应；(2)在发酵过程中不产生焦精、内毒素等，并且它具有更好的环境适应能力；(3)最重要的优势是，酿酒酵母更是契合了食用安全性，能够广泛地应用于食品医药以及保健品行业中。国外学者大本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可用于高效生产角质酶的角质酶基因，其特征在于其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种可用于高效生产角质酶的角质酶基因，其特征在于其核苷酸序列如SEQ IDN0.1所示。2.权利要求1所述角质酶基因的获得方法，其特征在于将编码角质酶基因进行合成优化得到tfu,并在N端人为添加a -factor信号肽及kozak序列。3.有权利要求1或2所述角质酶基因的基因工程菌及转基因细胞系。4.权利要求3所述的基因工程菌，其特征在于所述基因工程菌为将权利要求1所述的角质酶基因通过表达载体PYES2转化酿酒酵母INVscI所得。5.有权利要求1或2所述角质酶基因的表达载体或克隆载体。6.权利要求1所述的表达 载体，其特征在于优选表达载体PYES2。7.一种利用权利要求3所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王淼，康振，蔡彦秋，陈坚，堵国成，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：