一种基于核酸适体的可捕获癌细胞的微流控芯片及其制备和癌细胞的分离方法技术

本发明专利技术公开了一种基于核酸适体的可捕获癌细胞的微流控芯片，由上层聚合物芯片和下层玻片载体可逆封接而成，两者之间设有细胞捕获通道，通道底表面表现为凹凸不平；底表面上固定有亲和素。微流控芯片的制备包括以下步骤：先通过光刻制作芯片模具，再浇铸得到聚合物芯片；玻片载体经氢氟酸处理后与聚合物芯片键合；最后在细胞捕获通道内固定亲和素制得微流控芯片。本发明专利技术的微流控芯片可用于癌细胞的分离，分离时先向样本中加入修饰有生物素的核酸适体，孵育；将孵育后的混合溶液通入微流控芯片中，混合溶液中的目标癌细胞通过生物素与亲和素的结合，实现对目标癌细胞的分离。本发明专利技术具有细胞捕获效率高、操作简便、通用性强、成本低等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及 一种细胞分离技术，尤其涉及一种可用于癌细胞分离的微流控芯片和分离方法。
技术介绍
癌症，亦称恶性肿瘤，其是因控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞除了生长失控外，还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分，严重威胁人类健康。癌细胞的捕获，尤其是从原生癌细胞组织上脱落下来进入人体外周血液及组织中的循环癌细胞的捕获，对于癌症的早期诊断、治疗效果的评估有极其重要的意义。在过去的几十年间，人们开发了很多种用以捕获癌细胞的技术，如:荧光免疫法、磁性免疫法等。然而，这些技术所需的仪器昂贵，操作方法复杂，推广难度大。因此，开发一种小型、廉价、操作简单的癌细胞捕获仪器是非常有意义的。微流控芯片技术由于制作成本低、试剂消耗少、检测速度快、功能集成度高等优点越来越受到研究人员的关注。人们已经逐步利用微流控芯片实现了对循环癌细胞的高通量筛选、计数以及表征等技术。Faley S等利用440个18 μ mX 18 μ mX 10 μ m的聚二甲基娃氧烧(Polydimethylsiloxane, PDMS)微结构捕获阵列成功地实现了对OM+T细胞的捕获(F本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于核酸适体的可捕获癌细胞的微流控芯片，所述微流控芯片由上层PDMS聚合物芯片和下层的玻片载体可逆封接而成，所述微流控芯片上设有进样口和出样口，所述PDMS聚合物芯片和玻片载体之间设有蛇形状的细胞捕获通道，所述细胞捕获通道将所述进样口和出样口连通，所述细胞捕获通道的内上表面设有自上往下突出的鱼骨形结构，其特征在于：所述细胞捕获通道的底表面为凹凸不平的玻片载体表面；所述细胞捕获通道的底表面上固定有亲和素。

【技术特征摘要】
1.一种基于核酸适体的可捕获癌细胞的微流控芯片，所述微流控芯片由上层PDMS聚合物芯片和下层的玻片载体可逆封接而成，所述微流控芯片上设有进样口和出样口，所述PDMS聚合物芯片和玻片载体之间设有蛇形状的细胞捕获通道，所述细胞捕获通道将所述进样口和出样口连通，所述细胞捕获通道的内上表面设有自上往下突出的鱼骨形结构，其特征在于:所述细胞捕获通道的底表面为凹凸不平的玻片载体表面；所述细胞捕获通道的底表面上固定有亲和素。2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于:所述凹凸不平的玻片载体表面是经过氢氟酸腐蚀处理后成型得到。3.一种微流控芯 片的制备方法，包括以下步骤: (1)PDMS聚合物芯片:先用绘图软件绘制PDMS聚合物芯片掩膜版图，并使用高分辨率激光打印机打印在透明胶片上制得光刻掩膜板，然后利用此光刻掩膜板并通过光刻工艺制作得到芯片模具； (2)PDMS浇铸:将PDMS前聚体与固化剂按常规质量比进行物理混合，充分搅拌，真空脱气后浇铸在上述步骤(I)制得的芯片模具上，烘干固化后冷却，得到PDMS聚合物芯片； (3)氢氟酸处理:将氢氟酸溶液均匀涂覆在一洁净的玻璃表面，静置后用水洗净，用氮气吹干，得到玻片载体； (4)键合:将步骤(2)制得的PDMS聚合物芯片与步骤(3)制得的玻片载体加压可逆键合，得到半成品； (5)亲和素的修饰:将含有亲和素的磷酸缓冲液通过半...

【专利技术属性】
技术研发人员：羊小海，王青，王柯敏，赵庆，
申请(专利权)人：湖南大学，
类型：发明
国别省市：