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一种提高肝片吸虫Cat L1(FhCat L1)DNA疫苗免疫保护率的方法技术

技术编号:8673604 阅读:238 留言:0更新日期:2013-05-08 12:43
一种提高肝片吸虫Cat?L1(FhCat?L1)DNA疫苗免疫保护率的方法,所述方法从提高其抗原在树突状细胞中的呈递作用入手,利用树突状细胞(DC)的表面分子的DEC-205的单链抗体scFvNLDC-145能靶向DC细胞的重要作用机理,提高Spragae-Dawley大鼠在免疫编码FhCat?L1的DNA疫苗后对肝片吸虫感染的抵抗力,从而提高FhCat?L1的DNA疫苗的免疫保护率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种提高抗肝片吸虫FhCat LI DNA疫苗免疫保护率的方法。具体涉及利用树突状细胞(DC)表面分子DEC-205的单链抗体SCFVNU)e_145靶向DC细胞,提高Spragae-Dawley大鼠在免疫编码FhCat LI基因的DNA疫苗后对肝片吸虫感染的抵抗力,从而提高抗肝片吸虫Cat LI DNA疫苗的免疫保护率。
技术介绍
肝片吸虫是一种寄生性蠕虫,能引起牛、羊等反刍动物及人的严重吸虫病[I]。在世界范围内,肝片吸虫病直接影响着畜牧业的发展和人类健康,据估计每年可造成约20亿美元的经济损失[2],是一种不可忽视的重要人畜共患寄生虫病。对此病的防治一般采用三氯苯咪唑等化学药物,但这些药物只对早期的未成熟虫体或成虫具有良好效果,对感染后期的治疗不佳。最近发现,家畜已对三氯苯咪唑等化学药物产生耐药性[3-5]。同时,人们对畜产品中化学药物残留量的要求也越来越严格,这给利用化学药物控制吸虫病带来极大困难。因此,防治吸虫病急切需要一种能替代化学药物的治疗方法,这就给疫苗发展带来了良好契机[6]。事实上,到目前为止,有很多肝片吸虫的疫苗候选分子如谷胱甘肽S转移酶(GST本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提高肝片吸虫Cat?L1(FhCat?L1)DNA疫苗免疫保护率的方法,所述方法包括以下步骤:1)运用反转录聚合酶链式反应RT?PCR扩增目的基因肝片吸虫Cat?L1,将扩增得到的Cat?L1基因回收后连接入pMD18?T载体,获得pMD?Cat?L1(SEQ?ID?NO.2);2)利用大肠杆菌工程菌(Escherichia?coli)和真核细胞Cos7表达目的蛋白;3)?制备?Cat?L1多克隆抗体4)纯化和鉴定目的蛋白5)设计合成单链抗体scFvNLDC?145的核苷酸序列SEQ?ID?NO.1:用单链抗体片断scFvNLDC?145序列,在其5“和3“分别加入CACC碱基和BamH?...

【技术特征摘要】
1.一种提高肝片吸虫Cat LI (FhCat LI) DNA疫苗免疫保护率的方法,所述方法包括以下步骤: 1)运用反转录聚合酶链式反应RT-PCR扩增目的基因肝片吸虫CatLI,将扩增得到的Cat LI基因回收后连接入pMD18-T载体,获得pMD-Cat LI (SEQ ID N0.2); 2)利用大肠杆菌工程菌(Escherichiacoli)和真核细胞Cos7表达目的蛋白; 3)制备CatLI多克隆抗体 4)纯化和鉴定目的蛋白 5)设计合成单链抗体ScFvm45的核苷酸序列SEQID N0.1:用单链抗体片断ScFvm45序列,在其5’和3’分别加入CACC碱基和BamH I序列后进行全基因合成,合成片断命名为...

【专利技术属性】
技术研发人员:罗洪林
申请(专利权)人:西南大学
类型:发明
国别省市:

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