一种从土壤中分离尖孢镰刀菌的方法技术

本发明专利技术提供一种从土壤中分离尖孢镰刀菌的方法，将受尖孢镰刀菌侵染的土壤研细并过20目筛，加入琼胶液，搅拌后静置至病原菌悬浮；吸取悬浮液置于选择性培养基上，于23～26℃、无光条件下，培养至菌丝体长出并形成菌落；挑取菌丝体移植至新的选择性培养基上，重复培养2～3次；从菌落中挑取菌丝体移植至PSA培养基上，于23-26℃、无光条件下，培养2～4天；选择单独的菌丝，并用毛细管从该菌丝顶端插入后，连同培养基一同切下，置于新的PSA培养基上，于相同条件下，培养3～4天，得尖孢镰刀菌。为监测土壤中尖孢镰刀菌的数量及土壤消毒效果提供技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种尖孢镰刀菌的分离方法，尤其是一种从发生百合枯萎病的土壤中分离尖孢镰刀菌的方法，属于生物

技术介绍
尖抱键刀菌ifusarium oxysporum Schlechtend Fr.)是一种世界性分布的土传病原真菌，寄主范围广泛，可引起100多种植物维管束萎蔫的病害。该菌也能引起百合的种球基盘腐烂，是百合生产过程中发生最严重的病害之一，全世界百合种植区均有感染和为害的报道。该菌主要危害百合种球基部和鳞片，发病后球根基盘或鳞片上产生褐色坏死或腐烂，造成鳞片散落。从病鳞茎长出的植株明显矮化，叶片发黄或变紫，花茎少而小，严重时整株枯萎死亡。百合贮运过程中病害可持续危害，导致大量鳞茎腐烂，造成严重损失。在我国，百合枯萎病是一种历史性病害，在云南、广州、甘肃等主要百合种植地均有发生危害的报道。近年来由于百合种植面积不断 扩大，加之镰刀菌引起的枯萎病是种传病害，可随种球交易发生大规模传播，百合枯萎病有逐年加重的趋势。随着云南切花百合栽培面积的不断扩大，昆明、玉溪等百合主要种植地枯萎病的发生日趋严重，成为制约切花百合品质提高的重要因素之一。尖孢镰刀菌是一类既可侵染植物，也本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从土壤中分离尖孢镰刀菌的方法，经过下列各步骤：1）将受尖孢镰刀菌侵染的土壤研细并过20目筛，按0.01～0.02g土壤/ml琼胶液的量，在土壤样中加入质量浓度为0.1～0.2%的琼胶液，搅拌均匀后静置至病原菌悬浮；2）按悬浮液∶培养基=0.5～1∶25的体积比，吸取步骤1）的悬浮液置于选择性培养基上，于23～26℃、无光条件下，培养至菌丝体长出并形成菌落；所述选择性培养基如下：每升蒸馏水中含有下列组分：磷酸二氢钾KH2PO4??????????????1.0g硫酸镁MgSO4·7H2O?????????????0.5g蛋白胨?????????????????????????5.0g琼胶??...

【技术特征摘要】
1.一种从土壤中分离尖孢镰刀菌的方法，经过下列各步骤: 1)将受尖孢镰刀菌侵染的土壤研细并过20目筛，按0.01 0.02g 土壤/ml琼胶液的量，在土壤样中加入质量浓度为0.1 0.2%的琼胶液，搅拌均匀后静置至病原菌悬浮； 2)按悬浮液:培养基=0.5 1: 25的体积比，吸取步骤I)的悬浮液置于选择性培养基上，于23 26°C、无光条件下，培养至菌丝体长出并形成菌落；所述选择性培养基如下:每升蒸馏水中含有下列组分: 磷酸二氢钾KH2PO41.0g 硫酸镁 MgSO4.7H200.5g 蛋白胨5.0g 琼胶20.0g 青霉素30 100 mg 链霉素30 50 mg 利福平50 200mg 五氯硝基苯50 150 mg ； 3...

【专利技术属性】
技术研发人员：张艺萍，杨秀梅，瞿素萍，王祥宁，王继华，苏艳，彭绿春，张丽芳，王丽花，
申请(专利权)人：云南省农业科学院花卉研究所，
类型：发明
国别省市：